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1991 年度 研究成果報告書概要

骨誘導能を有する生体材料の開発:骨誘導因子の精製とその臨床応用への基礎研究

研究課題

研究課題/領域番号 01480451
研究種目

一般研究(B)

配分区分補助金
研究分野 補綴理工系歯学
研究機関徳島大学

研究代表者

松本 直之  徳島大学, 歯学部, 教授 (00013871)

研究分担者 山下 菊治  徳島大学, 歯学部, 助手 (30182497)
岡本 康生  徳島大学, 歯学部附属病院, 助手 (50213989)
堀内 政信  徳島大学, 歯学部, 助手 (10219214)
市川 哲雄  徳島大学, 歯学部附属病院, 講師 (90193432)
宮本 雅司  徳島大学, 歯学部, 助手 (30145007)
研究期間 (年度) 1989 – 1991
キーワード骨誘導因子 / アテロコラ-ゲン / ハイドロキシアパタイト / アルカリホスファタ-ゼ / 無細胞性石灰化沈着 / 筋衛星細胞
研究概要

I.精製
塩酸にて脱灰したウシ骨粉より塩酸グアニジンにて抽出した画分から,限外濾過法にて分子量10ー100kDaの画分を集めた.これを,水に対して透析後に水司溶性骨誘導因子の粗画分を得た.これよりヘパリンセファロ-スカラム,ゲル濾過クロマトグラフィ-を用いて,高い骨誘導活性(ラット移植実験により誘導された骨組織のアルカリフォスファタ-ゼ活性で,塩酸グアニジン抽出物に比べ約680倍)を有する画分を得た.さらに,高速逆相クロマトグラフィ-により,SDSーPAGEで分子量18kDaの単一のバンドとして認められる骨誘導活性を有する画分を精製した.(現在,投稿準備中).
II.活性検定法
1)in vitro ラット骨格筋由来細胞および頭蓋骨骨膜由来細胞が本因子に高い反応性を有することを見いだし,本因子とのcoーcultureによって,硬組織を速やかかつ高率に誘導する系を確立した.
2)in vivo アテロコラ-ゲンを坦体とした移植体のラット筋肉内での骨誘導活性を組織学的,生化学的(ALP活性,Ca含量等)パラメ-タ-にて移植後早期に判定する系を確立した.
III.移植実験
骨誘導因子の部分精製品の動物内移植実験により,骨誘導に関する以下の事項が明かとなった.1)軟骨誘導に先行する時期に,移植片への無細胞性の石灰化沈着を認め,骨誘導開始機構に関する全く新しい概念を提唱した.2)筋肉内移植実験では,筋衛星細胞が骨芽細胞へ分化する知見がえられた.3)また,臨床応用を想定した移植実験では,多孔質ハイドロキシアパタイトブロックおよびアテロコラ-ゲンの坦体としての有効性が示唆された.

  • 研究成果

    (12件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (12件)

  • [文献書誌] Yasuo Okamoto: "Muscle Tissue Reactions to Implantation of Bone Matrix Gelatin." Clin.Orthoped.263. 242-253 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Yasuyuki Horisaka: "The Ultrastructure of Cartilage Formation from Neonatal Sdkletal Muscle in vitro." Arch.Histol.Cytol.54(2). 163-172 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Kikuji Yamashita: "Architecture of Implanted Bone Matrix Gelatin Influences Heterotopic Calcification and New Bone Formation." Proc.Soc.Exp.Biol.Med.197(3). 342-347 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Kikuji Yamashita: "Effect of Bupivacaine on Muscle Tissue and New Bone Formation." Acta.Anat.141. 1-7 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Yasuyuki Horisaka: "Subperiosteal Implantation of Bone Morphogenetic Protein Adsorbed to Hydroxyapatite." Clin.Orthoped.268. 303-312 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Kikuji Yamashita: "Analysis of minerals on initial calcification induced by bone matrix gelatin." Jpn.J.Oral Biol.33. 166-173 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] Yasuo Okamoto: "Muscle Tissue Reactions to Implantation of Bone Matrix Gelatin" Clin. Orthoped.263. 242-253 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Yasuyuki Horisaka: "The Ultrastructure of Cartilage Formation from Neonatal Skeletal Muscle in vitro" Arch. Histol. Cytol.54(2). 163-172 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Kikuji Ymashita: "Architecture of Implanted Bone Matrix Gelatin Influences Heterotopic Calcification and New Bone Formation" Proc. Soc. Exp. Biol. Med.197(3). 342-347 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Kikuji Yamashita: "Effect of Bupivacaine on Muscle Tissue and New Bone Formation" Acta. Anat.141. 1-7 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Yasuyuki Horisaka: "Subperiosteal Implantation of Bone Morphogenetic Protein Adsorbed to Hydroxyapatite" Clin. Ortoped.268. 303-312 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] Kikuji Yamashita: "Analysis of Minerals on Initial Calcification induced by Bone Matrix Gelatin" Jpn. J. Oral Biol.33(2). 166-173 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より

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公開日: 1993-03-16  

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