1990 年度実績報告書

先天多発奇形におけるDNA複製酵素遺伝子およびホメオティック遺伝子の解析

研究課題

研究課題/領域番号	01480500
研究機関	東海大学
研究代表者	守内哲也東海大学, 医学部, 助教授 (20174394)
研究分担者	岩崎克彦東海大学, 医学部, 助教授 (10119646)
キーワード	PCNA / DNAポリメラ-ゼβ / γークリスタリン / 植物 / ショウジョウバエ / DNA複製 / ホメオボックス蛋白 / 先天奇形
研究概要	1.DNAポリメラ-ゼδ補助蛋白(PCNA)とホメオボックス蛋白に関する研究:我々がクロ-ニングしたラットPCNAのcDNAをプロ-ブにして高等植物のイネのPCNA遺伝子をクロ-ニングし、そのアミノ酸配列が動植物界でよく保存されていることを証明した。さらにショウジョウバウのPCNA遺伝子をクロ-ニングし、大腸菌で産生させたショウジョウバエのホメオボックス蛋白(eve,zen)と反応させ、DNaseーI footprint法で解析したところ、5'上流の三つの領域にこれらの蛋白が結合することが証明された。この成果をヒトに応用する目的でヒトのPCNAおよびホメオボックス4A遺伝子をクロ-ニングした。 2.先天奇形におけるDNA複製遺伝子およびホメオボックス(Hox)遺伝子の異常に関する研究:重症先天奇形15例のDNAにおいてPCNA、DNAポリメラ-ゼαおよびβ遺伝子の遺伝子異常を検索した。DNAを10種類以上の制限酵素で消化してそれぞれをサザンブロット解析を行なった結果、PCNA、DNAポリメラ-ゼβおよびα遺伝子の対立遺伝子の一方に異常のある先天奇形の1症例を見出した。健常人95例中の1例にDNAポリメラ-ゼβとγークリスタリン遺伝子に異常のある1例を見出した。次にDNAを10種類の制限酵素で消化して、Hox4AとHox4Bプロ-ブでサザンブロット解析を行なったが異常なバンドも多型性も全く検出されなかった。Hox4の近傍の多型性DNAマ-カ-(γークリスタリン遺伝子)をプロ-ブとして、先天奇形15例と健常人95例をPstI消化のDNAについて検索した。正常DNAでは2.1kbと1.7kbのヘテロ接合性のバンドの頻度は53%で、1.7kbのホモ接合性のバンドの頻度は27%であるのに対し、重症先天奇形ではそれぞれ7%と73%であった。この結果は重症先天奇形の遺伝子座がγークリスタリンの遺伝子座と連鎖していることを示していると考えられる。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Suzuka,I.: "Gene for proliferatingーcell nuclear antigen(DNA polymerase δ auxiliary protein) is present in both mammalian and higher plant genomes." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 86. 3189-3193 (1989)
[文献書誌] Yoshida,M.C.: "Chromosome assignment of the PCNA gene for human proliferating cell nuclear antign." Jpn.J.Human Genet.34. 62 (1989)
[文献書誌] Moriuchi,T.: "A polymorphic DNA marker genetically linked to congenital malformation." Nucleic Acids Res.(Symp.Syr.). 21. 19-20 (1989)
[文献書誌] Yamaguchi,M.: "Drosophila PCNA/cyclin gene:Structure,expression during development,and specific binding of homeodomain proteins to its 5'ーflanking region." Mol.Cell Biol.10. 872-879 (1990)
[文献書誌] Moriuchi,T.: "Proliferating cell nuclear antigen (PCNA):a nuclear protein engaged in eukaryotic DNA replication for one billion years." Med.Sci.Res.18. 911-915 (1990)
[文献書誌] Yamaguchi,M.: "Structural analysis of mouse gene and pseudogenes for proliferating cell nuclear antigen (DNA polymerase δ auxiliary protein." J.Biol.Chem.submitted.
[文献書誌] 小路武彦: "新生化学実験講座分子免疫学第12巻 I.免疫細胞・サイトカイン" 東京化学同人, 6 (1989)

1990 年度 実績報告書

先天多発奇形におけるDNA複製酵素遺伝子およびホメオティック遺伝子の解析

研究代表者

守内 哲也 東海大学, 医学部, 助教授 (20174394)

研究成果

[文献書誌] Suzuka,I.: "Gene for proliferatingーcell nuclear antigen(DNA polymerase δ auxiliary protein) is present in both mammalian and higher plant genomes." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 86. 3189-3193 (1989)

[文献書誌] Yoshida,M.C.: "Chromosome assignment of the PCNA gene for human proliferating cell nuclear antign." Jpn.J.Human Genet.34. 62 (1989)

[文献書誌] Moriuchi,T.: "A polymorphic DNA marker genetically linked to congenital malformation." Nucleic Acids Res.(Symp.Syr.). 21. 19-20 (1989)

[文献書誌] Yamaguchi,M.: "Drosophila PCNA/cyclin gene:Structure,expression during development,and specific binding of homeodomain proteins to its 5'ーflanking region." Mol.Cell Biol.10. 872-879 (1990)

[文献書誌] Moriuchi,T.: "Proliferating cell nuclear antigen (PCNA):a nuclear protein engaged in eukaryotic DNA replication for one billion years." Med.Sci.Res.18. 911-915 (1990)

[文献書誌] Yamaguchi,M.: "Structural analysis of mouse gene and pseudogenes for proliferating cell nuclear antigen (DNA polymerase δ auxiliary protein." J.Biol.Chem.submitted.

[文献書誌] 小路 武彦: "新生化学実験講座 分子免疫学 第12巻 I.免疫細胞・サイトカイン" 東京化学同人, 6 (1989)

1990 年度実績報告書

守内哲也東海大学, 医学部, 助教授 (20174394)

[文献書誌] 小路武彦: "新生化学実験講座分子免疫学第12巻 I.免疫細胞・サイトカイン" 東京化学同人, 6 (1989)