| 研究概要 |
1.イネ萎縮ウイルスのゲノムRNAを抽出して5'末端にポリヌクレオチドキナ-ゼを用いて^<32>Pを標識した。
2.ラベルしたRNAをアルカリ限定分解して二次元電気泳動により3'末端の塩基配列を決定した。
3.3'末端の塩基配列はゲノムセグメント9(S9)を除いて……UGAU3'であった。S9は……CGAU3'であった。
4.イネ茎縮ウイルスの転写産物RNAをin vitroで合成し、その5'末端をゲノムと同様に^<32>Pでラベルし、2次元電気泳動により5'末端の塩基配列を決定した。この方法でS3〜12までの5'末端の塩基配列を決定できた。S1と2はゲノムの3'末端にRNAリガ-ゼを用いてラベルし同じく2次元電気泳動で解析した。S1,2,3,5,6,8では5'GGCAAA……でありS4,7,9,10,11,12は5'GGUAAAであり、2通りの共通保存配列が認められた。
5.以上イネ茎縮ウイルスの全セグメントの末端塩基配列を決定した。両末端には5'で6塩基、3'で4塩基の共通保存配列が同定された。このうち5'GGUA……UGAU3'は同じ植物レオウイルスサブグル-プ1に属するwound tumor virusと同じであった。
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