| 研究概要 |
リボンソ-ムを構成する各成分の合成を同調して行なわせている機構を、高等動物で明らかにすることを目的に、ラットのリボソ-ム蛋白遺伝子のクロ-ニングを行い、S11,S26,L27,L35aなどの各々の蛋白について多数の遺伝子クロ-ンを単離した。しかし、これまでに分析を終えたものは全て、いわゆるptogessed pseudogeneであり、すでに報告しているように、哺乳類のリボソ-ム蛋白遺伝子が、各々多数の偽遺伝子を含むgene familyを構成することを再確認する結果となった。
このような多数の偽遺伝子の中から、発現している遺伝子をクロ-ン化するための方法論的検討が必要となり、核内のmRNA前駆体に対するcDNAクロ-ンを作り、このイントロン部分をプロ-ブとして遺伝子クロ-ンの選別を行う方法、polymerase chain reactionによって、遺伝子のイントロン部分を増幅プロ-ブとする方法などの検討を行った。
ラットのリボソ-ム蛋白遺伝子のクロ-ニングについては、本年度はこのような予備的実験に終始したが、方法論的な解決はついたので、精力的に実験を進め早急に真正遺伝子を得たいと考えている。一方、鳥類では、リボンソ-ム蛋白遺伝子は哺乳類のような複雑な構成はとらず、単一遺伝子から成っているので、そのクロ-ン化は容易と考えて、鶏のリボソ-ム蛋白遺伝子クロ-ニングをも開始した。現在、鶏のcDNAライブラリ-、遺伝子ライブラリ-より、ラットのcDNAをプロ-ブとしてcross-hybridizationを利用してクロ-ンの選択と精製を進めている。
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