| 研究課題/領域番号 |
01570145
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| 研究機関 | (財)大阪バイオサイエンス研究所 |
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研究代表者 |
渡辺 紀久子 (財)大阪バイオサイエンス研究所, 第2研究部, 研究員 (90211672)
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| 研究分担者 |
KUCHINKE Wol (財)大阪バイオサイエンス研究所, 第2研究部, 外国人特別研究員
早石 修 (財)大阪バイオサイエンス研究所, 所長 (40025507)
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| キーワード | プロスタグランジン / PGF_2α / 光親和ラベル / PGD還元活性 / PGF合成酵素 |
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| 研究概要 |
PGF合成酵素は、分子量36,666の単一鎖の蛋白示で、NADPH存在下に異なる活性部位でPGH_2およびPGD_2を還元し、それぞれPGF2αおよびPGF2αの立体異性体で生理活性の異なる9α、11βーPGF2を生成する酵素である。昨年度までの研究に於て、本酵素はN末端より130番目付近のアミノ酸で二つのペプチドに分離し、^<195>ProがPGD_2の活性部位に関連することを明らかにしてきた。本年度は、二つの活性部位を更に明らかにするためにPGD_2の誘導体を用い本酵素を光親和ラベルし、PGD_2の活性部位に関与する3アミノ酸を決定することが出来、これらのアミノ酸がPGD_2の活性部位あるいは結合部位を形成しているものと考えられる。現在これらのアミノ酸を遺伝子操作を用い部位特異的変異を行い、PGD_2の還元活性に対する影響を見ることにより、PGD_2の還元活性に関与していることの確認をおこなっている。
また、cDNAの3'末端からの削減で、本酵素のC末端からわずか数残基のアミノ酸が、PGD_2の還元活性の発現に関与していることが明らかになった。
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