ヒトT細胞応答を誘導する日本住血吸虫虫卵抗原のエピト-プ解析

1990 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 01570214
• 研究機関: 岡山大学
• 研究代表者: 太田 伸生 岡山大学, 医学部, 助教授 (10143611)
• 研究分担者: 安治 敏樹 岡山大学, 医学部, 講師 (10032905) ; 石井 明 岡山大学, 医学部, 教授 (40012752)
• キーワード: 日本住血吸虫 / T細胞クロ-ン / Tウェスタン / 抑制性T細胞 / イディオタイプ

研究概要

日本住血吸虫感染においてヒトT細胞が認識する虫卵抗原エピト-プ発現分子を同定するためにTウェスタンによる検討を継続して行い、ヒトT細胞の主要な応答標的となる虫卵抗原分子を同定した。
1.Tウェスタンの改良および日本住血吸虫抗原を用いるための実験条件の設定を行った。従来は抗原付着ニトロセルロ-ス膜を直接T細胞培養へ添加していたが、これを微細粒子状にして添加することによって測定の感度と再現性が上昇することを確認した。予備実験の結果、各穴50μgの虫卵抗原を140×170mmの10%SDSーPAGEにかけ、ニトロセルロ-スへ電気的転写を行い、金コロイド染色の後、微細粒子状にする条件とした。
2.昨年度は慢性患者では虫卵抗原の720kD分画に対するT細胞応答がcD8(+)T細胞によって抑制されていることを観察したので、末梢単核細胞の抗HLAーDQ抗体処理によって免疫抑制を解除した条件で虫卵抗原に反応するT細胞株を作った。改良Tウェスタンによる認識分子の解析の結果、虫卵の分子量16KD、35KD、48KD、113KDの分子が慢性患者T細胞の主要な認識分子であることが判明した。その等電点は検索中である。これらのT細胞応答はILー2、INFーγ等の遅延型過敏反応に関与するサイトカインの著明な産生を伴い、本症の病理発現に重要な役割を担うことが示唆された。
3.患者T細胞の認識エピト-プと抗虫卵抗体イディオタイプの関係についても検討した。虫卵抗原に反応性のT細胞株は一部の日本住血吸虫感染ヒト血清に対して有意の増殖反応を示した。そのT細胞刺激活性はプロティンAカラムによって吸収されるためIgGの活性と考えられた。住血吸虫症における抗イディオタイプT細胞応答の詳しい機序は不明であるが、虫卵抗原のT細胞認識エピト-プと抗虫卵IgGイディオタイプに何らかの関連したアミノ酸配列の可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Ohta N.,Edahiro T.,Ishii A.,Yasukawa M & Hosaka Y.: "HLAーDQーcontrolled T cell response to soluble egg antigen of Schistosoma japonicum in humans." Clinical and Experimental Immunology. 79. 403-408 (1990)
• [文献書誌] 太田 伸生: "ヒト住血吸虫症と免疫応答" 感染・炎症・免疫. 20. 25-38 (1990)
• [文献書誌] Ota N.,Asahi H.,Hosaka Y.,Minai M & Ishii A.: "Regulation of human T cell response to Schistosoma japonicum egg antigen by concomitant cellular and humoral mechanisms in vitro." Parasitology Research. 77. 54-58 (1991)
• [文献書誌] 太田 伸生: "HLAと感染" Medical Immunology. (1991)
• [文献書誌] 太田 伸生,安治 敏樹,松岡 裕之,東儀 宣哲,小野 俊朗,新井 明治,枝廣 徹,石井 明: "日本住血吸虫症の免疫病理学的究:宿主T細胞の応答制御を通じた病因解析および寄生虫による宿主の発がん機構について" 岡山医学会雑誌. 103. (1991)
• [文献書誌] Ohta N.,Song J & Ishii A.: "Comparison of T and B lymphocyteーrecognition molecules of Schistosoma japonicum egg antigen in humans."