| 研究課題/領域番号 |
01570228
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| 研究種目 |
一般研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
細菌学
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| 研究機関 | 千葉大学 |
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研究代表者 |
野田 公俊 千葉大学, 医学部, 教授 (60164703)
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| 研究分担者 |
盛永 直子 千葉大学, 医学部, 助手 (20092108)
加藤 巌 千葉大学, 医学部, 教授 (40012702)
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| 研究期間 (年度) |
1989 – 1990
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| キーワード | 黄色ブドウ球菌 / α毒素 / ロイコシジン / ADPーリボシルトランスフェラ-ゼ / GTP結合蛋白質 / ホスホリパ-ゼC / プロティンキナ-ゼC / PI代謝 |
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| 研究概要 |
平成元年度および2年度の研究実施計画に従って順調な研究成果を得ることができた。その成果を概略すると以下のようになる。
1.実験に用いた黄色ブドウ球菌のα毒素とロイコシジンは、加藤と野田の方法で精製し結晶化した標品を用いた。この標品はSDSーPAGEでそれぞれ1本の蛋白バンドとして泳動した極めて高純度標品であった。
2.α毒素は新しいADPーリボシルトランスフェラ-ゼを活性をもつ毒素であることを初めた明らかにした。α毒素によってADPーリボシル化される赤血球膜蛋白質は、主として、37kDaと41kDaであり、前者はホスホリパ-ゼA_2を、後者はPI代謝系のホスホリパ-ゼCの活性を制御しているGAP結合蛋白質であることが示唆された。さらに、α毒素は、赤血球膜のプロティンキナ-ゼCを活性化させることも初めて明らかにした。この酸素によってリン酸化されてる蛋白はBand4.1と呼ばれるものであった。プロティンキナ-ゼCの特異的阻害剤であるstaurosporineを用いることによって、Band4.1のリン酸化抑制がみられたことから、このBand4.1のリン酸化がα毒素による溶血機構に重要な役割を担うことが示唆され、α毒素の溶血機構解明に大きな前進が得られた。
3.ロイコシジンもα毒素と同様に新しいADPーリボシルトランスフェラ-ゼであることを初めて明らかにした。特に、ウサギ多核白血球膜の37kDaと41kDaの蛋白をADPーリボシル化した。これらの蛋白は、それぞれホスホリパ-ゼA_2とPI代謝系のホスホリパ-ゼCの活性を制御するとみられるGTP結合蛋白質である。ロイコシジンのF成合はPI代謝系のホスホリパ-ゼC,PIPキナ-ゼを活性化させること、さらにS成分と協同してPlキナ-ゼを活性化させることも明らかにすることができた。今後これらの知見をもとにさらにロイコシジンの白血球崩壊機構を明らかにできるものと考えた。
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