T細胞ハイブリド-マを用いた慢性関節リウマチにおける免疫制御機構の解析

1989 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 01570371
• 研究機関: 東京女子医科大学
• 研究代表者: 宮坂 信之 東京女子医科大学, 医学部, 助教授 (30157622)
• キーワード: 慢性関節リウマチ / 滑膜増殖 / インタ-ロイキン / ハイブリド-マ

研究概要

慢性関節リウマチ(RA)の炎症の主座は関節滑膜である。病理組織学的にはTリンパ球(特にCD4+細胞)の血管周囲性浸潤が著明にみられるが、その機能は不明な点が多い。そこで我々は、RA関節滑膜組織由来Tリンパ球の果たす役割について解析する目的で、T細胞ハイブリド-マを樹立し、産生されるサイトカインについて検討を加えた。
〔方法〕ヒトT細胞白血病株CCRF-CEMを限界希釈法によりクロ-ニングしたemetin-actinomycin D感受性クロ-ンと、インタ-ロイキンIで刺激したRA関節滑膜由来単核球を用いて細胞融合を行った。滑膜細胞増殖誘導活性の測定には、RA関節滑膜よりペトリ皿付着法を用いて得られた滑膜細胞を用いた。IL-1,IL-6の測定には既報のバイオアッセイを用いた。
〔結果〕上記方法により、培養開始6週目より10%胎児子牛血清存在下で自律性に増殖する細胞株約30種を得た。これに対して、親株あるいはfiller細胞のみの培養では全く細胞株を得ることはできなかった。これらの細胞株はいずれもCD3抗原を表出しており、CD4抗原あるいはCD8抗原のいずれかをも発現していた。また染色体数は親株に比較して約10本増加していることが確認された。得られたT細胞ハイブリド-マの中に、弱いながらIL-6を産生するものがみられたが、IL-2産生株はみられなかった。また、滑膜細胞増殖誘導因子を産生するものを数種認め、この活性はIL-1、IL-6によるものではないことが確認されたが、現在、その他の既知のサイトカインとの異同について検討中である。

研究成果

• [文献書誌] 宮坂信之,山岡國士,Anders Rosen,小安重夫: "A VARIANT OF INTERLEUKIN(IL-1)IS PRODUCED BY A HUMAN B LYMPHOBLASTOID CELL LINE" 厚生省特定疾患自己免疫疾患調査研究班昭和63年度研究業績. 72-74 (1989)
• [文献書誌] 宮坂信之,井上裕子,山本一彦,山本興太郎: "T細胞ハイブリド-マを用いた慢性関節リウマチの免疫制御機構の解析" 厚生省特定疾患自己免疫疾患調査研究班昭和63年度研究業績. 90-92 (1989)
• [文献書誌] 宮坂信之,立石睦人,山本興太郎: "SLEにおけるEBVの関与" 厚生省特定疾患自己免疫疾患調査研究班昭和63年度研究業績. 49-50 (1989)
• [文献書誌] N.Miyasaka,K.Sato,K.Yamamoto,M.Goto,K.Nishioka: "Immunological and immunohistochemical analysis of rheumatoid rodules" Annals of the Rheumatic Diseases. 48. 220-226 (1989)
• [文献書誌] N.Miyasaka,K.Yamaoka,M.Tateishi,K.Nishioka,K.Yamamoto: "Possible involvement of Epstein-Barr Virus(EBV)in polyclonal B cell activation in Sjogren's Syndrome" J.Autoimmunity. 2. 427-432 (1989)
• [文献書誌] N.Miyasaka,K.Sato,J.Hashimoto,H.Kohsaka,K.Yamamoto,M.Goto,K.Inoue,K.Nishioka: "Constitutive production of interleukin 6/B cell stimulatory factor-2 from inflammatory synovium" Clin.Immuno.Immunopathol. 52. 238-247 (1989)