| 研究概要 |
AH100B細胞を体重80〜120gの雄呑龍ラット(本実験ではこの規格の動物を用いた。)の左總頚動脈内に注入し、2周後に開腹し、直径1粍前後の肝転移結節を採取し、その1個ずつを正常ラットの腹腔内に少量の生食水と共に注入して各転移結節の癌細胞を遊離化した。すなわち、約2週後、ラットから腹水を血性とならぬ時期に採取して、正常ラットの腹腔内に再移植す。対照は転移形成のために血管内に注入したAH100B細胞をラット腹腔内にて経代移植したものを用いた。インドメサシン投与群は転移癌細胞群も対照群でも腹腔内へ再移植5日目から開始し、7日目に各群から腹水を血性とならぬ時期に採取し、各群の腹水を遠心し、上清をセパックC18(ウオ-タ-ズ製)にアプライし、エイコサノイド画分を抽出し、アルゴン気中にて濃縮乾固し、これをアセトニトリルに溶解し、山口らの方法にてBr-DMEQを用いて蛍光ラベルし、本研究費にて購入したHPLC(送液系-LC7A型,蛍光検出器-RF525,島津製)にてエイコサノイドを高感度に検出・分離し、フラクションコレクタ-(フラック200、ファルマシア製)でピ-クを分取した。その際スタンダ-ドとして6ケトPGFα,PGF_<1α>,PGF_<2α>,PGE_1,PGE_2,PGD_2,PGA_2,TXB_2,LTB_4,LTC_4,を用いた。転移癌細胞を腹腔内移植した腹水は、対照のそれに比して6ケトPGF_<1α>,PGF_<2α>,TXB_2,PGE_2,などの濃度は高かったが、その他に未知のエイコサノイドと考えられるピ-クを認めたので、これらのものについては分取して、GC-MSを用いての分析により構造を明らかにすべく研究を行っている。さらに、それらの生理活性も追及中である。*山口ら:J・Chromatogr.,380巻,257頁,1986年
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