モノクロ-ナル抗体を用いた心筋梗塞画像診断法の開発-臨床への応用と再潅流例での実験的検討

1989 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 01570467
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 山沖 和秀 東京大学, 医学部(病), 助手 (70182409)
• 研究分担者: 中岡 秀光 東京大学, 医学部(病), 医員 ; 矢崎 義雄 東京大学, 医学部(病), 助教授 (20101090)
• キーワード: 心筋梗塞 / ミオシン / モノクロ-ナル抗体 / 抗ミオシン抗体 / シンチグラム / インジウム / 早期診断 / 血中消失率

研究概要

〔目的〕^<111>In標識抗ミオシン・モノクロ-ナル抗体による心筋梗塞の画像診断において、梗塞発症数時間以内の早期診断が困難なことが、今まで、大きな問題であった(抗体投与後、約24時間しないと良好な画像が得られない)。これは、抗体の血中からの消失率が遅く、早期には、血中に残存する^<111>In抗体が多いことが原因であった。そこで、本年度は、抗体の標識法とFabの結合法を改良し、抗体の血中からの消失率を早めることが可能か否かを検討した。〔方法〕従来、^<111>InーDTPAー抗体Fa分画の構造であったものを、DTPA(2官能基)に炭素数3個ないし、6個のアミノ基(SPACER)を結合し、それらを、DTSSP(中央にS-S結合を持つ)を介し、抗体Fabに結合した。塩化^<111>Inと混和することで、「^<111>n-DTPA SPACER-DTSSP-抗体Fab」標品が得られる。これについて、抗体としての性質、血中からの消失率、心筋梗塞における、抗体の梗塞部への集積率などにつき、実験的に検討した。〔結果・考案〕抗体のミオシンに対する親和性や、抗体に結合するDTPA量は、改良後も、不変であった。しかし、標品作製時に抗体Fabに結合しなかったDTPAが、従来7-13%あったものが、1-3%へと減少した。このことは、抗体投与後、遊離DTPA-111Inによる肝臓などへの非特異的集積が減少し、コントラストの良い画像が得られることが期待される。ウサギ・イヌにおいて、改良後、血中消失率が早くなっていた。これは、血中に残存する抗体が、DTSSPのS-S結合部で分解され、分子量が小さくなり、尿から排泄し易くなるためと考えられた。実際、尿中排泄率も、改良後には、増加しており、分解産物も多く認めた。イヌの実験的梗塞でも、「梗塞/正常心筋」集積比を測定したが、従前法とほぼ同じであった。今後、臨床例でも、改良法により、実際に、血中消失率が早く、尿中排泄が促進され、早期の画像診断が可能かどうかを検討する予定である。

研究成果

• [文献書誌] Masahiko Kurabayashi,et al.: "Molecular cloning and characterization of human atrial and ventricular myosin alkali chain cDNA clones." J.Biol.Chem.263. 13930-13936 (1988)
• [文献書誌] Hidetsugu Tsuchimochi,et al.: "Heterogeneity of β-type myosin isozymes in the human heart and regulational mechanisms in their expression.:Immunohistochemical study using monoclonal antibodies." J.Clin.Invest.81. 110-118 (1988)
• [文献書誌] Yoshio Yazaki,et al.: "Molecular analysis of cardiac hypertrophy." J.Pharmacobio-Dyn.12. s-100 (1989)
• [文献書誌] Issei Komuro,et al.: "Molecular cloning and characterization of a Ca^<2+>+Mg^<2+>-dependent adenosine triphosphatase from rat cardiac sarcoplasmic reticulum.:regulation of its expression by pressure overload and developmental stage." J.Clin.Invest.83. 1102-1108 (1989)
• [文献書誌] Mitsuaki Isobe,et al.: "Quantification of myocardial infarct size after coronary reperfusion by serum cardiac myosin light chain II in conscious dogs." Circ.Res.65. 684-694 (1989)
• [文献書誌] Mitsuaki Isobe,et al.: "Infarct sizing after Reperfusion by two-dimensional echocardiography and serum cardiac myosin light chain II in conscious dogs:Dissociation between early left ventricular wall motion and ultimate infarct size." Jpn.Circ.J.53. 1100-1107 (1989)
• [文献書誌] Yoshio Yazaki,et al.: "Cardiac mechanics and function in the normal and diseased heart" Springer-Verlag Tokyo, 63-72 (1989)
• [文献書誌] Yoshio Yazaki,et al.: "Cardiomyopathy Update 2 Hypertrophic Cardiomyopathy" University of Tokyo Press, 97-111 (1989)