| 研究概要 |
ヒト細胞の腫瘍化には癌遺伝子あるいは癌抑制遺伝子の変異が密接に関与することが明らかにされつつある。本研究では、皮膚角化細胞の増殖調節機構、その脱制御機構をめぐる細胞工学的研究を踏まえて、皮膚腫瘍、とくに表皮系の腫瘍を対象として、これらの遺伝子の異常を検討し、その臨床的意義や腫瘍化のメカニズムを明らかにしようと試みた。皮膚角化細胞の増殖はcAMP系をはじめ種々の増殖調節系によりコントロ-ルされていると考えられるが、癌遺伝子Haーrasの培養表皮細胞ヘの導入、発現により増殖が脱制御されることを見出した。次に、ヒトの表皮細胞由来の良性、悪性皮膚腫瘍におけるHaーras遺伝子の突然変異について解析を行なった。25例の表皮由来腫瘍組織(脂漏性角化症、ケラトアカント-マ、ボ-エン病、基底細胞上皮腫、有棘細胞癌)のパラフィン包理切片よりDNAを抽出しHaーras遺伝子のコドン12,13,61を含む領域をPCR法により増幅し、予想される点突然変異を有する合成オリゴヌクレオチドをプロ-ブとしてハイブリダイゼ-ションをおこなった。その結果、ケラトアカント-マ、基底細胞上皮腫各一例にコドン61のA→T transversionが検出されたが、他の腫瘍では点突然変異は見出されず、ヒト表皮腫瘍でHaーras遺伝子の点突然変異は低頻度であリ、ヒトの表皮細胞の病理学的特微や腫瘍化と直接関わっているとは考えにくいものであった。この結果は、ヒトの表皮腫瘍の発症機構は、Haーras遺伝子の点突然変異が高頻度に見出されるマウスの実験的皮膚腫瘍とは異なることを示唆しており、ヒトの腫瘍細胞を解析する重要性を考えさせた。現在、上記の癌遺伝子Haーrasの研究に加え、皮膚腫瘍における癌抑制遺伝子p53の構造異常について、p53遺伝子のなかで突然変異のhot spotsについて、PCR法とdirect sequencingを駆使して解析を進めている。
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