DNA増幅法によるリンパ球内HTLVー1ゲノムの検出とATLにおける臨床的意義

1990 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 01570689
• 研究機関: 長崎大学
• 研究代表者: 古川 鋼一 長崎大学, 医学部, 講師 (80211530)
• 研究分担者: 池田 柊一 長崎大学, 医学部, 助手 (10128150) ; 珠玖 洋 長崎大学, 医学部, 教授 (80154194)
• キーワード: DNA増幅法(PCR) / HTLVー1 / 成人T細胞白血病(ATL)

研究概要

1.前年度の研究において、pol領域内のDNAをPCR法で増幅し ^<32>p標識オリゴプロ-ブを用いたdot hybridizationによりHTLVー1感染者の末梢単核球中のHTLVー1ゲノムDNA量定量法を確立した。
2.前年に行った健常感染者に加え、HAM患者22名について末梢血単核細胞中のウイルスゲノム量を測定した結果、high genome dose群(10コピ-以上/100細胞)7名、moderately high群(1〜10コピ-)8名、moderately low群(0.1〜1コピ-)7名であり、健常感染者に比しlow genome dose群がいないこととhigh genome dose群が多いことが対照的であった。また、PA法及びp40^<tax>を用いたElA法によって測定した抗体反応を見ると、両測定系ともにHAM患者では同じウイルスgenome doseを示す健常感染者と比較して抗体価が高く、high immune responderであることが示された。
3.リンパ腫型ATL7名から得られた末梢単核細胞、リンパ節に対しstandard Southern法及びPCRによるウイルスgenome量の測定を行った。リンパ節では、サザン法にて1例を除き全てクロ-ナルなbandが得られPCR法でもhigh genome doseを示した。一方末梢血では、クロ-ナルbandを示したのは2例で、その1例はPCR法でhigh,他の1例はmoderately high genome doseであった。残り5例は、moderately highが2例、moderately lowが3例であった。以上よりATLの発症は必ずしもintermediate state (polyclonalにウイルス感染細胞が増加した状態)を経ずとも、末梢血ではlow genome doseの者からも発症し得ることが示唆された。
4.外来受診者の末血塗沫標本で異常リンパ球を確認した52件中48件(92%)が抗体陽性者であった。各ウイルスgenome dose群間における異常リンパ球の出現頻度を比較すると、genome doseが高いほど頻度は高値を示した。

研究成果

• [文献書誌] Takayama,K.et al.: "Similarity of expression of low molecular weight G proteins,smg p21 A and ras p21,in normal and malignant human tissues." Cancer Res.
• [文献書誌] Furukawa,K.et al.: "Analysis of the fine specificities of 11 mouse monoclonal antibodies reactive with type 2 blood group determinants." Molecular Immunol.27. 723-732 (1990)
• [文献書誌] Furukawa,K.et al.: "Tumor necrosis factor enhances GD3 ganglioside expression in cultured human melanocytes." Arch.Biochem.Biophys.281. 70-75 (1990)
• [文献書誌] Yamaguchi et al.: "Human monoclonal antibody with dual GM2/GD2 specificity derived from an immunized melanoma patient." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 87. 3333-3337 (1990)
• [文献書誌] Furukawa,K.et al.: "Gangliosides in Melanomas.In Human melanoma.From basic research to clinical application." SpringerーVerlag,Heidelberg., 557 (1990)
• [文献書誌] Furukawa,K.et al.: "Carbohydrate antigens on human cancer cells recognized by human monoclonal antibodies.In Cancer chemotherapy.Challenges for the future.Vol.5." Excerpta Medica,Tokyo., 364 (1990)