胎児性糖鎖抗原の解析と癌細胞における発現の機序

1989 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 01571197
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 瀧 孝雄 東京医科歯科大学, 医学部, 助教授 (10046295)
• 研究分担者: 飯田 静夫 東京医科歯科大学, 医学部, 教授 (00009987)
• キーワード: モノクロ-ナル抗体 / 胎児性糖鎖抗原 / ガングリオシド / 糖脂質 / 肝癌

研究概要

胎児性糖鎖抗原を検出する目的で胎便より得たガングリオシドをマウスに免疫し、モノクロ-ナル抗体を作製した。得られた抗体の中から、胎便のガングリオシドに反応性が良く、特異性の高いMSG-15を選び、以後の実験に用いた。胎便のモノシアロガングリオシド画分からMSG-15と反応する成分を精製し、500MHzNMR、エキソグリコシダ-ゼによる分解、モノクロ-ナル抗体を用いた解析、およびメチル化糖のガスクロマト-質量分析法等を用いて構造研究を行った。その結果、MSG-15が反応する糖脂質はNeuAcα2-6Galβ1-3Galβ1-34GlcNAcβ1-4Glcβ1-1Cer(S2-6PG)であった。またその他のガンブリオシドを用いた実験からMDG-15が認認する構造はNeuAcα2-6Galβであることが明らかとなった。
次に、MSG-15を用いて、ヒト肝癌組織中のNeuAcα2-6Galβ構造をもつ糖脂質の検出を行った。用いた9検体のすべてにMSG-15と反応する糖脂質が検出された。その成分の割合はモノシアロガングリオシド画分の13ー50%にまで達していた。しかし、健常人の肝や肝硬変組織中にはMSG-15と反応する成分はほとんど検出されないかあるいは検出されても1%以下であった。また、肝癌組織中に検出されるMSG-15と反応する物質はS2-6PGの他にさらに二種類の成分が認められた。これらの成分は胎便中のMSG-15と反応するS2-6PG以外の成分と薄属クロマトプレ-ト上同一の挙動を示し、シアリダ-ゼ処理後の化学的性質も一致していることから、これらは同じ糖鎖構造をもつものと思われる。現在、これらの糖脂質を分析中であるが、正常組織にはこれまで報告されていない新しい糖鎖構造をもつことが明らかとなってきた。
以上の結果より、NeuAcα2-6Galβは一種の胎児性糖鎖抗原であること、肝癌細胞で再び出現する癌関連抗原であることが明らかとなった。肝癌ではNeuAcα2-6Galを合成する糖転位酵素活性が上昇すると思われる。

研究成果

• [文献書誌] TAKI,T.: "Accumulation of gangliosides with N-acetylneuraminosyl(α2ー6)-lactosamine structure in primary hepatoma." Cancer Res,. (1990)
• [文献書誌] TAKI,T.: "A simple and specific assay of glycosyltrandferase and glycosidase activities by an enzyme-linked immunosorbent assay method and its application to assay of galactosyltransferase activity in sera from patients with cancer." J.Biochem. 107. 493-498 (1990)
• [文献書誌] TAKI,T.: "Glycolipids as cell growth modulator." Trends in Glycoscience and Glycotechnology. 1. (1990)
• [文献書誌] 瀧孝雄: "糖脂質糖鎖のがん性変化とモノクロ-ナル抗体" 生化学. 61. 177-193 (1989)
• [文献書誌] 瀧孝雄: "生体成分の分析:糖脂質" ぶんせき. 8. 638-644 (1989)
• [文献書誌] TAKI,T.: "Gangliosides and Cancer" Oettgen H.P.(VHS press), 366 (1989)
• [文献書誌] 瀧孝雄: "新生化学実験講座第4巻脂質" 東京化学同人(村松正實), inPress (1990)