抗腫瘍性サイトカイン細胞障害機序のリポソ-ム膜システムによる解析

1990 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 01580165
• 研究機関: 徳島大学
• 研究代表者: 吉村 哲郎 徳島大学, 酵素科学研究センター, 助教授 (30035472)
• 研究分担者: 前沢 重礼 徳島大学, 酵素科学研究センター, 助手 (70173698) ; 曽根 三郎 徳島大学, 医学部・附属病院, 講師 (40145024)
• キーワード: 抗腫瘍性サイトカイン / リポソ-ム / マクロファ-ジ / リポソ-ム膜結合型サイトカイン / インタ-ロイキンー4 / 細胞障害作用 / 細胞内挙動

研究概要

研究代表者は、抗腫瘍性サイトカインの細胞障害機序の詳細がほとんど不明である現状を踏まえ、その点を明らかにするため、リポソ-ム膜システムの導入を計画し、研究分担者と協力して次の点を明らかにした。
1.腫瘍細胞内導入リポソ-ムの活用による抗腫瘍性サイトカインの腫瘍細胞障害作用機序の解析
本課題を円滑に遂行するため、まず、マクロファ-ジを用いて検討を加え、有効な蛍光プロ-ブ封入リポソ-ムの調製に成功した。そして、そのリポソ-ムの細胞内動態を顕微蛍光法により解析し、エンドサイト-シスの有無の判定システム及び細胞内動態の速度論的解析システムを確立した。現在、このシステムを腫瘍細胞に導入し、抗腫瘍性サイトカイン細胞障害作用の主要経路及び主要反応の検討を行っている。
2.リポソ-ム膜結合型サイトカインの調製及びその活用による抗腫瘍性サイトカインの作用機序の解析
現在、ILー4が、末梢血単球の殺腫瘍活性及びTNFやILー1産生を抑制すること、リポソ-ムに封入したILー4も同様の作用を発現することを見出している。そこで、リポソ-ム膜結合型ILー4を調製し、その作用機序解析を開始した。
今後、リポソ-ム封入及び膜結合型サイトカインの腫瘍細胞障害機序を検討する。そのために、リポソ-ム腫瘍細胞内動態の速度論的解析システムの確立、リポソ-ム封入及び膜結合型サイトカインの腫瘍細胞内取り込み及び腫瘍細胞増殖抑制機能の検討、リポソ-ム封入及び膜結合型サイトカイン腫瘍細胞内動態の速度論的解析等を行う。そして、これらの結果をもとに、サイトカインの腫瘍細胞における細胞障害活性発現機序を分子論的に解明する。

研究成果

• [文献書誌] Tetsuro Yoshimura: "Role of Phosphatidylserine in Membrane Actions of Tumor Necrosis Factor and Interferons α and γ" Biochemistry International. 20. 697-705 (1990)
• [文献書誌] 吉村 哲郎: "サイトカインの膜作用" 免疫薬理. 8. 38 (1990)
• [文献書誌] Tetsuro Yoshimura: "Kinetic Analysis of Endocytosis and Intracellular Fate of Liposomes in Single Macrophage Cells"
• [文献書誌] Chikamasa Yamashita: "Potential Value of Cetylmannosideーmodified Liposomes as Carriers of Macrophage Activators to Human Blood Monocytes" Japan Journal of Cancer Research. (1991)
• [文献書誌] Tetsuro Yoshimura: "Membrane Perturbation as a Possible Cytotoxic Mechanism of TNF and Interferons.in Tumor Necrosis Factor:Structure,Mechanism of Action,Role in Disease and Ther." Karger,Basel, 7 (1990)
• [文献書誌] 寺田 弘: "ライフサイエンスにおけるリポソ-ムー実験マニュアルー" SpringerーVerlag,Tokyo, (1991)