多価不飽和脂肪酸による白血球機能の調節

1989 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 01636508
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 水上 茂樹 九州大学, 医学部, 教授 (90037325)
• 研究分担者: 住本 英樹 九州大学, 医学部, 助手 (30179303) ; 南里 宏樹 九州大学, 医学部, 助手 (80150415) ; 竹重 公一朗 九州大学, 医学部, 助教授 (10037450)
• キーワード: 好中球 / ラット肝 / ロイコトリエンB_4 / チトクロムP-_<450> / ω-水酸化反応

研究概要

好中球は食作用時や種々の刺激に応じて、細胞膜リン脂質からアラキドン酸を遊離しロイコトリエンB_4を生産し炎症部位に好中球を集める。ロイコトリエンB_4はヒト好中球によりω水酸化される。この反応は好中球ミクロソ-ムに特異的なチトクロムP_<450>(ロイコトリエンB_4ω-ヒドロキシラ-ゼ)によるものである。水酸化誘導体はさらに酸化されてカルボキシ誘導体となり白血球走化活性等の主要な生理活性を失う。この反応は細胞質のアルコ-ルデヒドロゲナ-ゼおよびミクロソ-ムのアルデヒドデヒドロゲナ-ゼにより起きる。
今年度は、ヒト好中球細胞質からω-ヒドロキシ細胞酸に特異的なアルコ-ルデヒドロゲナ-ゼを単離し、好中球ミクロソ-ムとの共同作用によって20-ヒドロキシロイコトリエンB_4を20-カルボキシル誘導体にすることを示した。単離したアルコ-ルデヒドロゲナ-ゼの分子量は80KDa(37KDaのダイマ-)で、その等電点はpH6.0であった。
20-ヒドロオキシロイコトリエンB_4はまた、ロイコトリエンB_4ω-ヒドロキシラ-ゼ(チトクロムP_<450>)によって20-オキソロイコトリエンB_4を経て20-カルボキシロイコトリエンB_4となる。すなわち、水酸化および2段階の脱水素の3段階からなる反応がチトクロムP_<450>系によって触媒される。このことは、これらの反応の一酸化炭素による阻害が450nmの光により回復することや、エイコサペンタエン酸に由来するロイコトリエンB_5によるヒドロキシ誘導体の脱水素反応の競争阻害などにより示された。

研究成果

• [文献書誌] Ishida,K.: "GTP-dependent and iudependent activation of superoxide producing NADPH oxidase in a neutrophil cell-free system" FEBS Lett.243. 169-172 (1989)
• [文献書誌] Takasugi,S.: "Effect of 2',3'-dialdehyde NADPH on activation of superoxide-producing NADPH oxidase in a cell-free system of pig neutrophils" J.Biochem.105. 155-157 (1989)
• [文献書誌] Gotoh,Y.: "Purification and characterization of 20-hydroxy-leukotriene B_4 dchydrogenase in human neutrophils" Eur.J.Biochem.179. 315-321 (1989)
• [文献書誌] Osaki,M: "N^+a/H^+ exchange modulates the production of leukotriene B_4 by human ncutrophils" Biochem.J.257. 751-758 (1989)
• [文献書誌] Sumimoto,H.: "Oxidation of 20-hydroxy leukotriene B_4 to 20-carboxy-leukotriene B_4 by human neutrophil microsomes" J.Biol.Chem.265. (1990)
• [文献書誌] Nozaki,M.: "Reconstitution of the partially purified membrane component of the superoxide-generating NADPH oxidase of pigneutrophils with phospholipid" Eur.J.Biochem.(1990)