1989 年度実績報告書

VIIIーVon Willebrand因子.IX因子の分子生物学的研究

研究課題

研究課題/領域番号	01637003
研究機関	名古屋大学
研究代表者	斎藤英彦名古屋大学, 医学部, 教授 (20153819)
研究分担者	高橋芳右新潟大学, 医学部, 助手 (70163285) 千谷晃一藤田学園保健衛生大学, 医学部, 教授 (60179942) 福井弘奈良県立医科大学, 教授 (20075104)
キーワード	第VIII因子 / 第IX因子 / Von Willebrand因子 / 血友病 / ビトロネクチン / フィブロネクチン
研究概要	日本人における血友病B(IX因子欠之症)の保因者診断にIX因子遺伝子近傍のDXS99が有用であること、および新しいIX因子遺伝子内多型性を見い出した。これはA^<192>→G変換で日本人女性での診断有効率は39%であった。vWfに対するモノクロナル抗体(NMCー4)を用いて、vWfの血小板膜GPIb結合ドメインの位置が、分子量97,000のフラグメント上にあることを明らかにした。また、TTP、DIC、CMLなどの血栓性疾患では、血漿中のvWf濃度が増加し高分子マルチマーが低下すると共に、一部ではvWfのフラグメント化がみられた。ヒト血漿中のビトロネクチンの微量測定法の開発とともに、2つの型が存在することを明らかにした。この原因としては遺伝子のポルモルフィズムが推定されており、現在DNA診断法を検討中である。プロティンAに遺伝子工学技術を用いてRGDSテトラペチチドを挿入した人工細胞接着蛋白質を作成した。この合成蛋白はプロティンAのIgG結合能に加えて、プラスチック表面にBHK細胞を接着する活性を示した。この方法の応用により種々の蛋白質にRGDSテトラペプチドを挿入した人工多機能細胞接着蛋白質を任意に作成できるものと思われる。本研究は、臨床医学と分子生物学の分野の研究者の緊密な協力のもとに研究を進めており、その成果は血栓形成、止血機構の解明に重要であると思われる。

研究成果
(17件)

すべてその他

すべて文献書誌 (17件)

[文献書誌] Miyata T.: "Fibrinogen Nagoya,a replacement of glutamin-329 by arginine in the γ-chain that impairs the polymerization of fibrin monomer." J Biolchem. 105. 10-14 (1989)
[文献書誌] Clarke,B.J.: "Mapping of a putative surface binding site of human coagulation factor XII." J Biol Chem. 264. 11497-11502 (1989)
[文献書誌] Tanimoto M.: "Extragenic factor IX gene RFLP is useful for detecting carriers of Japanese hemophilia B." Acta Haematol JPN. 52. 774-777 (1989)
[文献書誌] Suehiro K.: "Blood clotting factor IXB_M Nagoya:Substitution of arginine-180 by tryptophan and its activation by α-chymotrypsin and rat mast cell chymase." J Biol Chem. 264. 21257-21265 (1989)
[文献書誌] Miyata T.: "Coagulation factor XII(Hageman factor)Washington D.C.:Inactive factor XIIa resulting from replacement of cysteine-571 by serine." Proc Natl Acad Sci U.S.A.86. 9319-9322 (1989)
[文献書誌] 新家興: "抗von Willebrand因子(vWF)モノクローナル抗体NMCー4による血小板膜糖蛋白(GP)Ib結合ドメインの解析" 奈良医学雑誌. 40. 780-790 (1989)
[文献書誌] 新家興: "von Willebrand因子(vWF)フラグメント(97KDa,52148KDa,及びFIII-T2)と抗vWFモノクローナル抗体NMCー4の免疫反応性" 奈良医学雑誌. 40. 791-796 (1989)
[文献書誌] 新家興: "Ristocetin血小板凝集を抑制する抗von Willebrand因子モノクローナル抗体の多様性" 奈良医学雑誌. 40. 797-801 (1989)
[文献書誌] Sekiguchi K.: "Probing Molecular Polymorphism of Fibronectins with Antibodies Directed to the Alternatively Spliced Peptide Segments." Biochemistry. 28. 3293-3298 (1989)
[文献書誌] Maeda T.: "A Novel Cell Adhesive Protein Engineered by Insertion of the Arg-Gly-Asp-Ser Tetrapeptide." J Biol Chem. 264. 15165-15168 (1989)
[文献書誌] Ichihara-Tanaka,K.: "Recombinant Carboxyl-Terminal Fibrin-Binding Domain of Human Fibronectin Expressed in Mouse L Cells." J Biol Chem. 265. 401-407 (1990)
[文献書誌] Takahashi H.: "Coagulation studies in thrombotic thrombocytopenic purpura,with special reference to von Willebrand factor and protein S." Am J Hemat. 30. 14-21 (1989)
[文献書誌] Takahashi H.: "Thrombin generation in thrombotic thrombocytopenic purpara." Am J Hemat. 32. 255-257 (1989)
[文献書誌] Tatewaki W.: "Plasma von Willebrand factor proteolysis in patients with chronic myeloproliferative disorders:No possibility of ex vivo degradation by calcium-dependent proteases." Thromb Res. 56. 191-199 (1989)
[文献書誌] Izumi M.: "Vitronectin exists in two structurally and functionally distinct forms in human plasma." Biochim Biophys Acta. 990. 101-108 (1989)
[文献書誌] Miyamoto Y.: "Adsorption of vitronectin in human serum onto plastics is augmented by sodium dodecyl sulfate." Cell Struct Funct. 14. 151-162 (1989)
[文献書誌] 泉雅子: "細胞外マトリックスから細胞骨格系へ" 細胞工学. 18. 41-49 (1989)

1989 年度 実績報告書

VIIIーVon Willebrand因子.IX因子の分子生物学的研究

研究代表者

斎藤 英彦 名古屋大学, 医学部, 教授 (20153819)

研究成果

[文献書誌] Miyata T.: "Fibrinogen Nagoya,a replacement of glutamin-329 by arginine in the γ-chain that impairs the polymerization of fibrin monomer." J Biolchem. 105. 10-14 (1989)

[文献書誌] Clarke,B.J.: "Mapping of a putative surface binding site of human coagulation factor XII." J Biol Chem. 264. 11497-11502 (1989)

[文献書誌] Tanimoto M.: "Extragenic factor IX gene RFLP is useful for detecting carriers of Japanese hemophilia B." Acta Haematol JPN. 52. 774-777 (1989)

[文献書誌] Suehiro K.: "Blood clotting factor IXB_M Nagoya:Substitution of arginine-180 by tryptophan and its activation by α-chymotrypsin and rat mast cell chymase." J Biol Chem. 264. 21257-21265 (1989)

[文献書誌] Miyata T.: "Coagulation factor XII(Hageman factor)Washington D.C.:Inactive factor XIIa resulting from replacement of cysteine-571 by serine." Proc Natl Acad Sci U.S.A.86. 9319-9322 (1989)

[文献書誌] 新家興: "抗von Willebrand因子(vWF)モノクローナル抗体NMCー4による血小板膜糖蛋白(GP)Ib結合ドメインの解析" 奈良医学雑誌. 40. 780-790 (1989)

[文献書誌] 新家興: "von Willebrand因子(vWF)フラグメント(97KDa,52148KDa,及びFIII-T2)と抗vWFモノクローナル抗体NMCー4の免疫反応性" 奈良医学雑誌. 40. 791-796 (1989)

[文献書誌] 新家興: "Ristocetin血小板凝集を抑制する抗von Willebrand因子モノクローナル抗体の多様性" 奈良医学雑誌. 40. 797-801 (1989)

[文献書誌] Sekiguchi K.: "Probing Molecular Polymorphism of Fibronectins with Antibodies Directed to the Alternatively Spliced Peptide Segments." Biochemistry. 28. 3293-3298 (1989)

[文献書誌] Maeda T.: "A Novel Cell Adhesive Protein Engineered by Insertion of the Arg-Gly-Asp-Ser Tetrapeptide." J Biol Chem. 264. 15165-15168 (1989)

[文献書誌] Ichihara-Tanaka,K.: "Recombinant Carboxyl-Terminal Fibrin-Binding Domain of Human Fibronectin Expressed in Mouse L Cells." J Biol Chem. 265. 401-407 (1990)

[文献書誌] Takahashi H.: "Coagulation studies in thrombotic thrombocytopenic purpura,with special reference to von Willebrand factor and protein S." Am J Hemat. 30. 14-21 (1989)

[文献書誌] Takahashi H.: "Thrombin generation in thrombotic thrombocytopenic purpara." Am J Hemat. 32. 255-257 (1989)

[文献書誌] Tatewaki W.: "Plasma von Willebrand factor proteolysis in patients with chronic myeloproliferative disorders:No possibility of ex vivo degradation by calcium-dependent proteases." Thromb Res. 56. 191-199 (1989)

[文献書誌] Izumi M.: "Vitronectin exists in two structurally and functionally distinct forms in human plasma." Biochim Biophys Acta. 990. 101-108 (1989)

[文献書誌] Miyamoto Y.: "Adsorption of vitronectin in human serum onto plastics is augmented by sodium dodecyl sulfate." Cell Struct Funct. 14. 151-162 (1989)

[文献書誌] 泉雅子: "細胞外マトリックスから細胞骨格系へ" 細胞工学. 18. 41-49 (1989)

1989 年度実績報告書

斎藤英彦名古屋大学, 医学部, 教授 (20153819)