イノシト-ルリン脂質代謝産物によるK+チャンネルの制御機構

1989 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 01641512
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 東田 陽博 金沢大学, 医学部, 教授 (30093066)
• キーワード: シナプス / 終板電位 / イノシト-ルリン酸 / 伝達物質遊離 / アセチ-ルコリン / ニュ-ロブラスト-マ

研究概要

1.アセチ-ルコリンを、伝達物質とするニュ-ロブラスト-マ由来NG108-15細胞を培養した。
2.NG108-15細胞を、マウス胎児後肢横紋筋細胞の上に培養(co-culture)した。
3.NG108-15細胞、筋細胞両方に、ガラス微小電極を刺入し膜電位の測定を行った。
シナプスス反応(M.E.P.P.S)を記録し、NG108-15細胞がアセチ-ルコリンを放出し、筋細胞がそのアセチ-ルコリンに反応している事を確認した。
4.NG108ー15細胞に、さらにもう1本、IP_3を充めたガラス管を刺入し、電気泳動的に細胞内にIP_3を注入し、その際、シナプス反応が増加することを確認した。
5.IP_3によるシナプス反応の増加(プレシナブスファシリテ-ション)が、細胞外液中のCaによらないものである事を確認するため、IP_3注入時のシナプス反応促進を、Ca^<2+>フリ-条件下やCaブロッカ-であるニフェジピンやBa^<2+>存在下で測定した。
6.以上、IP_3注入時に生じるファシリテ-ションはプレシナプス膜の過分極でもなく、また細胞外から流入するCaでもないことを確認した。

研究成果

• [文献書誌] S.Numa et al.: "Molecular basis of the functional heterogeneity of the muscarinic acetylcholine receptor." Cold Spring Harbor Symposium on Quantitative Biology. 53. 295-301 (1988)
• [文献書誌] Brown,D.A et al.: "Role of G-protein coupled Pl system in signal transduction in vertebrate neurons:Experiments on neuroblastoma hybrid cells and ganlion cells." Cold Spring Harbor Symposium on Quantitative Biology. 53. 375-384 (1988)
• [文献書誌] S.Numa et al.: "Selective effector coupling of muscarinic acetylcholine receptor subtypes." Trends in pharmacol.Sci.Supple. 4-10 (1989)
• [文献書誌] S.Yokoyama et al.: "Pottassium channels from NG108-15 neuroblastoma-glioma hybrid cells.primary structure and function expression from cDNA." FEBS Letters. 259. (1989)
• [文献書誌] H.higashida et al.: "Bradykinin induces inositol 1,4,5-trisphosphate-dependent hyperpolarization in K+(M)-current deficienthybrid NL308 cells:A comparison with NG108-15 neuroblastoma x glioma hybrid cells." Glia. 3. 1-12 (1990)
• [文献書誌] A.Ogura et al.: "Bradyjinin-evoked acetylcholine release via inositol trisphophatetdependent elevation in free calcium in neuroblastoma x glioma hybrid cells." J.Biol.Chem.(1990)
• [文献書誌] H.higashida et al.: "Brain Signal Transduction and Memory" Academic Press, (1989)