| 研究分担者 |
岡崎 克則 東京農工大学, 農学部, 助手 (90160663)
中島 員洋 大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (60207777)
松田 治男 広島大学, 生物生産学部, 助教授 (80116863)
平井 寛二 東京医科歯科大学, 医学部, 教授 (00100991)
高橋 英司 東京大学, 農学部, 教授 (50183439)
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| 研究概要 |
現在,マレック病ウィルス(MDV)に起因する鶏のマレック病(MD)の予防には,主として七面鳥ヘルペスウィルス(HVT)の単価ワクチンが野外で広く用いられている。しかし現行のワクチンでは予防し得ない超強毒MDVによるMDが存在する。本研究はこのようなMDに対応し得るワクチン,組み換え体ワクチン、多価ワクチンあるいは成分ワクチンの開発を最終目的としている。本年度は免疫学的に重要なMDV誘導糖蛋白をコ-ドする遺伝子をバキュロヴイルス(BC)ベクタ-に挿入し,得られたリコンビナントウイルス(RCV)の抗原発現を重点的に検討した。
1).MDVのA抗原をコ-ドする遺伝子をBCに挿入し、RCVーAを得た。これを接種した細胞の表面にはA抗原が発現していることが蛍光抗体法により確認された。 ^<35>S標識抗原とA抗原特異的単クロ-ン性抗体を用いて免疫沈降を行ったところ,感染細胞可溶化中には多量の抗原が58ー68Kの位置に,また感染細胞上清には少量の抗原が46ー54Kの位置に認められた。発現A抗原はMDV感染血清と特異的に反応し,この抗原を接種した鶏の血清中にはMDV感染細胞と特異的に反応する抗体が検出された。
2)。MDV遺伝子中には単純ヘルパスウイルス(HSV)のgBに類似する糖蛋白をコ-ドする領域が存在する。この領域をBCに挿入して得たRCVーBは感染細胞の細胞質および細胞表面にMDV感染血清によって認識される蛋白を発現した。この蛋白はMDVのB抗原に対する単クロ-ン性抗体や免疫血清とも反応した。またSDSーPAGEおよびMDV感染血清を用いたイムノブロット法により88/100,64および54Kdの分子量からなる蛋白であることが明らかとなった。
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