1990 年度実績報告書

日本人ブル-ム症候群の分子的欠陥

研究課題

研究課題/領域番号	02151030
研究機関	京都大学
研究代表者	巽紘一京都大学, 医学部, 助教授 (30131022)
研究分担者	上田国寛京都大学, 医学部, 助教授 (00027070) 寺岡弘文東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助教授 (30019137) 高橋利和神戸大学, 医学部, 助手 (20154833) 栗原孝行金沢医科大学, 総合医科学研究所, 講師 (20064595)
キーワード	ブル-ム症候群 / DNAリガ-ゼ / pZ189 / 宿主回復 / PCR / ポリADP・リボ-ス
研究概要	SCE高値を示すブル-ム症候群(Bloom's syndrome;BS)リンパ芽球様細胞(LCL)の粗抽出液に含まれるDNAリガ-ゼ総活性と、これからHAカラムクロマトグラフィ-により分離できたリガ-ゼIの活性をそれぞれ測定した。昨年度にユダヤ人患者由来GM3403ではリガ-ゼI活性が正常対照の2分の1に減少しているのに対し、日本人患者由来BSL2KAでは正常人対照と差異を認めず、一方総活性は3403、2KA共に正常より1.5倍高いことを見出したが、新たに検索した他の3例の日本人BSLCL、F04、F05、F07ではリガ-ゼIが正常人の2分の1であり、総活性は同じ(F04)か低下(F05、F07)していた。標的遺伝子SupF内に新しくAvaIsiteを作成した改変シャトル・ベクタ-pZ189を用いて、当該制限酵素切断後のhost cell reactivation(宿主回復)と再結合後の突然変異頻度をBSLCLと正常人LCLで比較した。2KA、04、05、07と正常人対照LCLはAvaI切断後のpZ189生存率は共に約5%で、突然変異頻度は約70%だが有意差は認めなかった。合成プロ-ブを用いたスクリ-ニングでヒト・グリオ-マcDNAライブラリ-から、2個のクロ-ンを得た。PCRでリガ-ゼI活性中心から3'側に460bp長の産物を得て、次にこれをプロ-ブにヒト・ゲノムクロ-ニング及びBSLCL、正常LCLのRFLPを解析中である。ポリ(ADP・リボ-ス)シンセタ-ゼ、グリコヒドロラ-ゼ、ホスホジエステラ-ゼ、ADP・リボシルプロテインリア-ゼの4酵素活性が上記BSLCLと正常人LCL間に顕著な(2.5倍以上の)差異を示さなかった。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Kurihara,T.et al.: "Two types of DNA ligase I activity in lymphoblastoid cells from patients with Bloom's syndrome" Japan Journal of Cancer Research. 82. 51-57 (1991)
[文献書誌] Sawai,M.et al.: "Reversible G_1 arrest in the cell cycle of human lymphoid cell lines by dimethyl sulfoxide" Experimental Cell Research. 187. 4-10 (1990)
[文献書誌] Saito,I.et al.: "Cloning of a fullーlength cDNA encoding bevine thymus poly(ADPーribose)synthetase:evolutionarily conserved segments and thier potential functions" Gene. 90. 249-254 (1990)
[文献書誌] Arita,I.et al.: "Evidence for spontaneous conversion of Mex^ー to Mex^+ in human lymphoblastoid cells" Carcinogenesis. 11. 1733-1738 (1990)
[文献書誌] Takahashi,T.et al.: "βーglucosidase activity in liver,spleen and brain in acute neuropathic Gaucher disease" Brain & Development. 12. 202-205 (1990)
[文献書誌] Tachibana,A.et al.: "Molecular changes in UVーinduced and γーrayーinduced mutations in human lymphoblastoid cells" Mutation Research. 230. 159-166 (1990)
[文献書誌] 巽紘一: "ヒト培養細胞および染色体診断マニュアル" 講談社サイエンティフィック, 182 (1990)

1990 年度 実績報告書

日本人ブル-ム症候群の分子的欠陥

研究代表者

巽 紘一 京都大学, 医学部, 助教授 (30131022)

研究成果

[文献書誌] Kurihara,T.et al.: "Two types of DNA ligase I activity in lymphoblastoid cells from patients with Bloom's syndrome" Japan Journal of Cancer Research. 82. 51-57 (1991)

[文献書誌] Sawai,M.et al.: "Reversible G_1 arrest in the cell cycle of human lymphoid cell lines by dimethyl sulfoxide" Experimental Cell Research. 187. 4-10 (1990)

[文献書誌] Saito,I.et al.: "Cloning of a fullーlength cDNA encoding bevine thymus poly(ADPーribose)synthetase:evolutionarily conserved segments and thier potential functions" Gene. 90. 249-254 (1990)

[文献書誌] Arita,I.et al.: "Evidence for spontaneous conversion of Mex^ー to Mex^+ in human lymphoblastoid cells" Carcinogenesis. 11. 1733-1738 (1990)

[文献書誌] Takahashi,T.et al.: "βーglucosidase activity in liver,spleen and brain in acute neuropathic Gaucher disease" Brain & Development. 12. 202-205 (1990)

[文献書誌] Tachibana,A.et al.: "Molecular changes in UVーinduced and γーrayーinduced mutations in human lymphoblastoid cells" Mutation Research. 230. 159-166 (1990)

[文献書誌] 巽 紘一: "ヒト培養細胞および染色体 診断マニュアル" 講談社 サイエンティフィック, 182 (1990)

1990 年度実績報告書

巽紘一京都大学, 医学部, 助教授 (30131022)

[文献書誌] 巽紘一: "ヒト培養細胞および染色体診断マニュアル" 講談社サイエンティフィック, 182 (1990)