がん関連遺伝子および遺伝子産物の組織内検出とそのがん診断への応用

1990 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02151047
• 研究機関: 長崎大学
• 研究代表者: 珠玖 洋 長崎大学, 医学部, 教授 (80154194)
• 研究分担者: 中西 和夫 福井医科大学, 助教授 (10094434) ; 河田 光博 京都府立, 医科大学, 助教授 (60112512) ; 上田 龍三 愛知がんセンター, 化学療法, 部長 (20142169) ; 小路 武彦 長崎大学, 医学部, 講師 (30170179) ; 向井 清 国立がんセンター, 病理, 室長 (20190837)
• キーワード: in situ hybridization / 癌遺伝子 / 癌抑制遺伝子 / 免疫組織化学 / 人癌

研究概要

(1)合成オリゴヌクレオチドプロ-ベ又はトランスクリプションベクタ-を用いた標識RNAプロ-ベを用いた組織内mRNAの局在を検出するin situ hybridization法は共にantiーsense,senseプロ-ベを作製し得,特異性が高い。班員により両方法によるin situ hybridization法が基本的には確立された。
(2)in situ hybridization法および抗体利用による遺伝子産物の測定の検出により,両方法の測定の半定量化を行った。
(3)大腸がん,肺非小細胞癌組織にてp53のmRNAおよび蛋白を組織内に検出し,病変部の臨床病理所見と合わせて検討しその有意の関連性を明らかにした。
(4)EBVゲノムの上咽頭癌細胞内における局在およびHPV16E6,7遺伝子の同遺伝子導入トランスジエニックマウスより発生した腫瘍内での発現を共にin situ hybridization法により検出証明した。
(5)リンパ系におけるIgおよびTCR遺伝子再構成のリコンビネ-ス関連遺伝子RAGー1およびRAGー2の発現をリンパ系組織にてin situ hybridization法で調べその組織内分布を明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] Nagata,Y.et al.: "Glycine to aspartic acid mutations at codon 13 of the cーKiーras gene in human gastrointestinal cancers." Cancer Res.50. 480-482 (1990)
• [文献書誌] Sugimura,I.et al.: "In situ localization of the human multidrugーresistance gene mRNA using thymineーthymine dimerized single stranded cDNA." Jpn.J.Cancer Res.81. 949-955 (1990)
• [文献書誌] Uhara,H.et al.: "Detection of EpsteinーBarr virus DNA in ReedーSternberg cells of Hodgkin's disease using the polymerase chain reaction and in situ hybridization." Jpn.J.Cancer Res.81. 272-278 (1990)
• [文献書誌] Kawata,M.et al.: "In situ hybridization histochemistry with oligodeoxynucleotide probe as a tool for the detection of neuropeptide mRNAs." Acta histochem.cytochem.23. 307-325 (1990)
• [文献書誌] Seto,M.et al.: "bclー2 translocation in Japanese B cell lymphoma:Novel bclー2 transloction with immunoglobulin heavy chain diversity segment." Jpn.J.Cancer Res.
• [文献書誌] Murotani,M.et al.: "Application of microwave (MW)ーfixed tissue samples to in situ hybridization:Detection of carcinoembryonic antigen (CEA) mRNA and oncogene transcripts in MWーfixed colorectal carcinomas using sulfonated probes." Acta Histochem.Cytochem.23. 335-349 (1990)