“G_1期造血幹細胞"の分泌する細胞増殖抑制因子の精製と作用機序の解析

1990 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02152117
• 研究機関: 関西医科大学
• 研究代表者: 池原 進 関西医科大学, 医学部, 教授 (90108986)
• 研究分担者: 緒方 肇 関西医科大学, 医学部, 助手 (50169174) ; 比舎 弘子 関西医科大学, 医学部, 助手 (90151422) ; 土岐 純子 関西医科大学, 医学部, 助手 (40077681) ; 長田 憲和 関西医科大学, 医学部, 講師 (40155940) ; 稲葉 宗夫 関西医科大学, 医学部, 講師 (70115947)
• キーワード: natural suppressor cell / 造血幹細胞 / 抗腫瘍作用 / 液性因子

研究概要

(1)マウス造血幹細胞の精製方法を確立し、2種類(G_0期幹細胞とcycling phase幹細胞)に分けることができる。
(2)マウス造血幹細胞の中で、cycling phaseの幹細胞が強力な細胞増殖抑制機能を有する。さらにこの細胞は、液性因子を分泌している。
(3)この細胞は、wheat germ agglutinin(WGA)positiveで、ILー3 receptorを有する。それ故、ILー3でこの細胞の細胞増殖抑制活性が増強される。
(4)モンキ-やヒトにも、造血幹細胞分画に同様の細胞が存在する。
(5)ILー3R^+WGA^+細胞をNSー1とfusionさせ、細胞増殖抑制因子を分泌するhybridomaを樹立することに成功した。
(6)この液性因子の分子量は約20,000の蛋白である。
今後の目標としては、細胞増殖抑制因子を分泌するhybridomaが樹立されたので、この細胞上清より、液性因子を精製し、この因子をcodeしている遺伝子を決定する。この因子に対するreceptorを同定し、このreceptorを介してのsignal transductionの機構を明らかにし、細胞増殖のswitch on or offのメカニズムを解明する。さらに、この液性因子産生細胞の生物学的役割(例えば、血球分化のfeed back機構等)を、明らかにする。

研究成果

• [文献書誌] S.Ikehara et al.: "Organーspecific and systemic autoimmune diseases originate from defects in hematopoietic stem cells." Proc.Natl.Acad.Sci.87. 8341-8344 (1990)
• [文献書誌] K.Sugiura et al.: "Enrichment of natural suppressor activity in a wheat germ agglutinin positive hematopoietic progenitorーenriched fraction of monkey bone amrrow." Blood. 175. 1125-1131 (1990)
• [文献書誌] K.Sugiura et al.: "Inhibition of tumor cell proliferation by natural suppressor cells present in murine bone marrow." Can Research. 50. 2582-2586 (1990)
• [文献書誌] S.Ikehara et la.: "Longーterm observations of autoimmuneーprone mice treated for autoimmune disease by allogeneic bone marrow transplantation." Proc.Natl.Acad.Sci.86. 3306-3310 (1989)
• [文献書誌] K.Sugiura et al.: "Wheat germ aggluyininーpositive cells in a stem cellーenriched fraction of mouse bone marrow have potent natural suppressor activity." Proc.Natl.Acad.Sci.85. 4824-4826 (1988)
• [文献書誌] M.Inaba et al.: "Isolation of murine pluripotent hemopoietic stem cells in the G0 phase." Biochem.Biophys.Res.Commun.147. 687-694 (1987)