1990 年度実績報告書

リグノセルロ-ス資源の生物燃料への変換

研究課題

研究課題/領域番号	02203118
研究機関	大阪大学
研究代表者	吉田敏臣大阪大学, 工学部, 教授 (00029290)
研究分担者	卜部格大阪大学, 工学部, 助教授 (60029246) 堀之内末治東京大学, 農学部, 助教授 (80143410) 宮川都吉広島大学, 工学部, 教授 (10116676) 桑原正章香川大学, 農学部, 教授 (40035978) 沢田達郎金沢大学, 工学部, 教授 (80019728)
キーワード	リグノセルロ-ス / 爆砕 / リグニンペルオキシダ-ゼ / キシラン / セルラ-ゼ / キシロ-ス / Saccharomyces cerevisiae / エタノ-ル
研究概要	リグノセルロ-スからの微生物によるエタノ-ル生産プロセスを開発するため、リグノセルロ-スの前処理と生成セルロ-スとキシランを直接エタノ-ル発酵する菌の育種について研究を行い、以下の結果を得た。リグノセルロ-スの前処理として蒸煮・爆砕処理と過酸化水素・アルカリ処理を併用した複合処理の効果を検討し、蒸煮・爆砕単独処理の場合に比べて2〜3倍の高い酵素糖化率を得た(前川英一)。爆砕稲わらの抽出成分量、細孔径分布、酵素糖化率やアルコ-ル転換率を検討し、爆砕稲わらの糖化発酵には蒸気圧3.3〜3.8MPa蒸煮時間1.0〜3.5minの爆砕が最も効果的であるという結果を得た(沢田達郎)。担子菌Bjerkandera adustaのcDNAおよび染色体DNAからリグニンペルオキシダ-ゼ遺伝子をクロ-ニングし、その塩基配列を決定した。また培養にポリウレタンフォ-ムを用いて、本酵素の生産性を向上させた(桑原正章)。 Saccharomyces cerevisiaeにクロ-ニングするためのセルラ-ゼ遺伝子の供与体としてセルロ-ス資化性の高い酵母を分離し、精製酵素遺伝子のクロ-ニングを行い数個のポジティブクロ-ンを得た(宮川都吉)。枯草菌由来の中性セルラ-ゼと好アルカリ菌由来のアルカリセルラ-ゼを材料に用い、蛋白工学的手法により、pH4〜5の酸性領域での酵素活性に寄与する5個のアミノ酸残基を同定した(堀之内末治)。 Bacillus pumilisのβーキシロシダ-ゼ遺伝子(xynB)を大腸菌の中で高発現させ、その遺伝子産物を単一にまで精製し、性質を検討したところキシロビオ-スに対して既知の酵素と比較して高い活性を示すことを認めた(卜部格)。キシロ-スリダクタ-ゼとキシリト-ルデヒドロゲナ-ゼの遺伝子をS.cerevisiaeにクロ-ニングし高い酵素活性が得られたが、キシロ-スからエタノ-ルを生産したりキシロ-スを炭素源として増殖するには至らなかった(吉田敏臣)。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] K.Magara,et al.: "Low Level of Enzymatic Susceptibility of MicrowaveーPretreated Softwood" Mokuzai Gakkaishi. 36. 159-164 (1990)
[文献書誌] Y.Kimura,Y.Asada and M.Kuwahara: "Screening of Basidiomycetes for Lignin Peroxidase Genes Using a DNA Probe" Appl.Microbiol.Biotechnol.32. 436-442 (1990)
[文献書誌] A.Nakamura et al.: "Construction and Characterization of the Chimeric Enzymes between the <Bacillus>___ー <subtilis>___ー Cellulase and an Alkalophilic <Bacillus>___ー Cellulase" J.Biol.Chem.(1991)
[文献書誌] T.Hatano,M.Kosaka,M.Kawaguchi,C.Zhifeng,T.Miyakawa & S.Fukui: "Isolation and Characterization of Carboxymethylcelluloseーdegrading Enzyme Secreted by a Yeast Strain Isolated from Soil" J.Ferment.Bioeng.(1991)
[文献書誌] CaiーXi Pan et al.: "Expression of the Xylanーdegrading Genes of <Bacillus>___ー <pumilus>___ー IPO in <Saccharomyces>___ー <cerevisiae>___ー" J.Ferment.Bioeng.71. (1991)
[文献書誌] S.Takuma et al.: "Isolation of Xylose Reductase of <Pichia>___ー <stipitis>___ー and Its Expression in <Saccharomyces>___ー <cerevisiae>___ー" Appl.Biochem.Biotechnol.(1991)
[文献書誌] 越島哲夫、桑原正章、沢田達郎、他: "セルロ-ス資源のバイオテクノロジ-" 学会出版センタ-, 350 (1991)

1990 年度実績報告書

リグノセルロ-ス資源の生物燃料への変換

研究代表者

吉田敏臣大阪大学, 工学部, 教授 (00029290)

研究成果

[文献書誌] K.Magara,et al.: "Low Level of Enzymatic Susceptibility of MicrowaveーPretreated Softwood" Mokuzai Gakkaishi. 36. 159-164 (1990)

[文献書誌] Y.Kimura,Y.Asada and M.Kuwahara: "Screening of Basidiomycetes for Lignin Peroxidase Genes Using a DNA Probe" Appl.Microbiol.Biotechnol.32. 436-442 (1990)

[文献書誌] A.Nakamura et al.: "Construction and Characterization of the Chimeric Enzymes between the <Bacillus>_ー <subtilis>_ー Cellulase and an Alkalophilic <Bacillus>___ー Cellulase" J.Biol.Chem.(1991)

[文献書誌] T.Hatano,M.Kosaka,M.Kawaguchi,C.Zhifeng,T.Miyakawa & S.Fukui: "Isolation and Characterization of Carboxymethylcelluloseーdegrading Enzyme Secreted by a Yeast Strain Isolated from Soil" J.Ferment.Bioeng.(1991)

[文献書誌] CaiーXi Pan et al.: "Expression of the Xylanーdegrading Genes of <Bacillus>_ー <pumilus>_ー IPO in <Saccharomyces>_ー <cerevisiae>_ー" J.Ferment.Bioeng.71. (1991)

[文献書誌] S.Takuma et al.: "Isolation of Xylose Reductase of <Pichia>_ー <stipitis>_ー and Its Expression in <Saccharomyces>_ー <cerevisiae>_ー" Appl.Biochem.Biotechnol.(1991)

[文献書誌] 越島哲夫、桑原正章、沢田達郎、他: "セルロ-ス資源のバイオテクノロジ-" 学会出版センタ-, 350 (1991)

1990 年度 実績報告書

リグノセルロ-ス資源の生物燃料への変換

研究代表者

吉田 敏臣 大阪大学, 工学部, 教授 (00029290)

研究成果

[文献書誌] K.Magara,et al.: "Low Level of Enzymatic Susceptibility of MicrowaveーPretreated Softwood" Mokuzai Gakkaishi. 36. 159-164 (1990)

[文献書誌] Y.Kimura,Y.Asada and M.Kuwahara: "Screening of Basidiomycetes for Lignin Peroxidase Genes Using a DNA Probe" Appl.Microbiol.Biotechnol.32. 436-442 (1990)

[文献書誌] A.Nakamura et al.: "Construction and Characterization of the Chimeric Enzymes between the <Bacillus>___ー <subtilis>___ー Cellulase and an Alkalophilic <Bacillus>___ー Cellulase" J.Biol.Chem.(1991)

[文献書誌] T.Hatano,M.Kosaka,M.Kawaguchi,C.Zhifeng,T.Miyakawa & S.Fukui: "Isolation and Characterization of Carboxymethylcelluloseーdegrading Enzyme Secreted by a Yeast Strain Isolated from Soil" J.Ferment.Bioeng.(1991)

[文献書誌] CaiーXi Pan et al.: "Expression of the Xylanーdegrading Genes of <Bacillus>___ー <pumilus>___ー IPO in <Saccharomyces>___ー <cerevisiae>___ー" J.Ferment.Bioeng.71. (1991)

[文献書誌] S.Takuma et al.: "Isolation of Xylose Reductase of <Pichia>___ー <stipitis>___ー and Its Expression in <Saccharomyces>___ー <cerevisiae>___ー" Appl.Biochem.Biotechnol.(1991)

[文献書誌] 越島 哲夫、桑原 正章、沢田 達郎、他: "セルロ-ス資源のバイオテクノロジ-" 学会出版センタ-, 350 (1991)

1990 年度実績報告書

吉田敏臣大阪大学, 工学部, 教授 (00029290)

[文献書誌] A.Nakamura et al.: "Construction and Characterization of the Chimeric Enzymes between the <Bacillus>_ー <subtilis>_ー Cellulase and an Alkalophilic <Bacillus>___ー Cellulase" J.Biol.Chem.(1991)

[文献書誌] CaiーXi Pan et al.: "Expression of the Xylanーdegrading Genes of <Bacillus>_ー <pumilus>_ー IPO in <Saccharomyces>_ー <cerevisiae>_ー" J.Ferment.Bioeng.71. (1991)

[文献書誌] S.Takuma et al.: "Isolation of Xylose Reductase of <Pichia>_ー <stipitis>_ー and Its Expression in <Saccharomyces>_ー <cerevisiae>_ー" Appl.Biochem.Biotechnol.(1991)

[文献書誌] 越島哲夫、桑原正章、沢田達郎、他: "セルロ-ス資源のバイオテクノロジ-" 学会出版センタ-, 350 (1991)