1990 年度実績報告書

イノシト-ル燐脂質代謝を介するトランスメンブランコントロ-ル

研究課題

研究課題/領域番号	02223106
研究機関	神戸大学
研究代表者	田中千賀子神戸大学, 医学部, 教授 (20025571)
研究分担者	尾形悦郎東京大学, 医学部, 教授 (70013761) 日高弘義名古屋大学, 医学部, 教授 (80100171) 大沢利昭東京大学, 薬学部, 教授 (40012603) 野沢義則岐阜大学, 医学部, 教授 (10021362) 竹縄忠臣東京都老人総合研, 部長 (40101315)
キーワード	プロテインキナ-ゼC / アイソザイム / ホスホリパ-ゼC / イノシト-ル燐脂質 / カルシニュ-リン / プロテインフォスファタ-ゼ / 低分子量G蛋白質
研究概要	本年度は、Ca^<2+>シグナル系及びイノシト-ル燐脂質(PI)代謝に関与する種々の蛋白質の生化学的及び分子生物学的研究に加えて、これらの蛋白質が関与する種々の現象に関する薬理学的及び生理学的研究が行われた。 (1)低分子量G蛋白質ーホスホリパ-ゼ(PLC)系:ボツリヌス毒素が低分子量G蛋白質をADPーリボシル化するとともにリンパ球PLCの活性化を誘導することを発見し(大沢)、PLCがATP依存性に活性化されること、この活性化がイソフラボン化合物で抑制される事を見いだした(小河原)。PLCγ_2のZ領域がチロシンキナ-ゼやリン酸化蛋白の認識と活性化を行う部位であることを見いだした(竹縄)。(2)イノシト-ルリン酸認識蛋白質:IP_3、IP_4の分解に関与するフォスファタ-ゼに分子多様性を見いだした(中川)。IP_4アナログを化学合成し、IP_4認識蛋白質の活性中心の構造解析を行った(古賀)。(3)プロテインキナ-ゼC(PKC)アイソザイムとその局在:免疫電顕法を用いてPKC各分子種の神経細胞内特異分布を明らかにした。PKC各分子種に加え、カルモジュリン依存性酵素であるカルシニュ-リン(Aα、Aβ)のmRNAの脳内分布をin situ hybridization法により明らかにした(田中)。PKCアイソザイム間の機能的差異を、PKC過剰発現細胞を用いて転写活性化能を指標とする事により明らかにした(大野)。PKC分解産物に分子量8万の新しい活性化型酵素の存在を明らかにした(山村)。PKC分子種の活性変動を蛋白、mRNAレベルで解析し、それぞれが異なる細胞周期で機能する事を示唆し得た(荻田)。 (4)Ca^<2+>結合蛋白質及びフォスファタ-ゼの特性:合成カルモジュリン阻害剤をリガンドとしたアフィニティ-精製法により新しいEFーhand蛋白質を見いだした(日高)。プロテインフォスファタ-ゼ2AのδサブユニットがPKCにより燐酸化されることを見いだした(武田)。(5)PI代謝ーPKCの機能:単離前庭神経核細胞を用いた実験により、PKCのチャンネル制御機構における役割を示唆した(笹)。PI代謝に共役したグルタミン酸受容体が、海馬CA3シナプスにおける長期増強において重要な役割をはたしていることを示唆する結果を得た(杉山)。Balb/c3T3細胞においてインスリン様成長因子(IGFーI)により細胞内Ca^<2+>濃度の上昇及びPKCの持続的活性化が惹起されることを見いだした(尾形)。グリコフォリンー4、1蛋白質を介する赤血球膜変形能の調節にPI代謝が関与していることを明らかにした(石橋)。これら研究班員の研究成果は国内外の学術誌に掲載され、平成3年1月10〜11日に東京で開催された公開シンポジウム及び合同班会議で公表され、情報交換を行った。

研究成果

(16件)

すべてその他

すべて文献書誌 (16件)

[文献書誌] K.Ogita: "Protein kinase C in Saccharomyces cerevisiae;comparison with mammalian enzyme." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 87. 5011-5015 (1990)
[文献書誌] M.Kato: "Purification and characterization of membraneーbound and cytosolic forms of diacylglycerol kinase from rat brain." J.Biol.Chem.265. 794-800 (1990)
[文献書誌] I.Ito: "Allosteric potentiation of quisqualate receptors by a nootropic drug aniracetam." J.Physiol.(Lond.). 424. 533-543 (1990)
[文献書誌] N.Ishikawa: "Effect of a new Ca^<2+> calmodulin dependent protein kinase II inhibitor on GABA release in cerebrospinal fluid of the rat." J.Pharmacol.Exp.Ther.254. 598-602 (1990)
[文献書誌] M.Hirata: "Stereospecific recognition of inositol 1,4,5ーtrisphosphate analogs by the phosphatase,kinase,and binding proteins." J.Biol.Chem.265. 8404-8407 (1990)
[文献書誌] N.Nishizawa: "Mitogenic signaling pathway of growth factors can be distinguished by the involvement of pertussis toxinーsensitive guanosine triphosphateーbinding protein and of protein kinase C." Cell Regulation. 1. 747-761 (1990)
[文献書誌] S.Toyoshima: "Purification and partial amino acid sequences of phosphoinositideーspecific phospholipase C of Drosophila eye." J.Biol.Chem.265. 14842-14848 (1990)
[文献書誌] H.Ninomiya: "Phosphoinositide breakdown in rat hippocampal slices:Sensitivity to glutamate induced by in vitro anoxia." J.Neurochem.55. 1001-1007 (1990)
[文献書誌] A.Ito: "Immunocytochemical localization of the α subspecies of protein kinase C in rat brain" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 87. 3195-3199 (1990)
[文献書誌] A.Kose: "Electron microscopic localization of γーand βIIーsubspecies of protein kinase C in rat hippocampus" Brain Res.518. 209-217 (1990)
[文献書誌] M.Mori: "Immunocytochemical localization of protein kinase C subspecies in the rat spinal cord:Light and electron microscopic study" J.Comp.Neurol.299. 167-177 (1990)
[文献書誌] C.Yoshihara: "Differential localization of four subspecies of protein kinase C in the rat striatum and substantia nigra." J.Neurosci.(1991)
[文献書誌] T.Takaishi: "Differential distribution of the mRNA encoding two isoforms of the catalytic subunit of calcineurin in the rat brain" Biochem.Biophys.Res.Commun.174. 393-398 (1991)
[文献書誌] K.Taniyama: "Expression of the GABAB receptor in Xenopus oocytes and inhibition of the response by activation of protein kinase C" FEBS. 278. 222-224 (1991)
[文献書誌] Y.Nishizuka: "Advances in second messenger and phosphoprotein researchーThe biology and medicine of signal transduction" Raven Press, 750 (1990)
[文献書誌] K.Ogita: "Methods Enzymol." Academic Press, (1991)

1990 年度 実績報告書

イノシト-ル燐脂質代謝を介するトランスメンブランコントロ-ル

研究代表者

田中 千賀子 神戸大学, 医学部, 教授 (20025571)

研究成果

[文献書誌] K.Ogita: "Protein kinase C in Saccharomyces cerevisiae;comparison with mammalian enzyme." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 87. 5011-5015 (1990)

[文献書誌] M.Kato: "Purification and characterization of membraneーbound and cytosolic forms of diacylglycerol kinase from rat brain." J.Biol.Chem.265. 794-800 (1990)

[文献書誌] I.Ito: "Allosteric potentiation of quisqualate receptors by a nootropic drug aniracetam." J.Physiol.(Lond.). 424. 533-543 (1990)

[文献書誌] N.Ishikawa: "Effect of a new Ca^<2+> calmodulin dependent protein kinase II inhibitor on GABA release in cerebrospinal fluid of the rat." J.Pharmacol.Exp.Ther.254. 598-602 (1990)

[文献書誌] M.Hirata: "Stereospecific recognition of inositol 1,4,5ーtrisphosphate analogs by the phosphatase,kinase,and binding proteins." J.Biol.Chem.265. 8404-8407 (1990)

[文献書誌] N.Nishizawa: "Mitogenic signaling pathway of growth factors can be distinguished by the involvement of pertussis toxinーsensitive guanosine triphosphateーbinding protein and of protein kinase C." Cell Regulation. 1. 747-761 (1990)

[文献書誌] S.Toyoshima: "Purification and partial amino acid sequences of phosphoinositideーspecific phospholipase C of Drosophila eye." J.Biol.Chem.265. 14842-14848 (1990)

[文献書誌] H.Ninomiya: "Phosphoinositide breakdown in rat hippocampal slices:Sensitivity to glutamate induced by in vitro anoxia." J.Neurochem.55. 1001-1007 (1990)

[文献書誌] A.Ito: "Immunocytochemical localization of the α subspecies of protein kinase C in rat brain" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 87. 3195-3199 (1990)

[文献書誌] A.Kose: "Electron microscopic localization of γーand βIIーsubspecies of protein kinase C in rat hippocampus" Brain Res.518. 209-217 (1990)

[文献書誌] M.Mori: "Immunocytochemical localization of protein kinase C subspecies in the rat spinal cord:Light and electron microscopic study" J.Comp.Neurol.299. 167-177 (1990)

[文献書誌] C.Yoshihara: "Differential localization of four subspecies of protein kinase C in the rat striatum and substantia nigra." J.Neurosci.(1991)

[文献書誌] T.Takaishi: "Differential distribution of the mRNA encoding two isoforms of the catalytic subunit of calcineurin in the rat brain" Biochem.Biophys.Res.Commun.174. 393-398 (1991)

[文献書誌] K.Taniyama: "Expression of the GABAB receptor in Xenopus oocytes and inhibition of the response by activation of protein kinase C" FEBS. 278. 222-224 (1991)

[文献書誌] Y.Nishizuka: "Advances in second messenger and phosphoprotein researchーThe biology and medicine of signal transduction" Raven Press, 750 (1990)

[文献書誌] K.Ogita: "Methods Enzymol." Academic Press, (1991)

1990 年度実績報告書

田中千賀子神戸大学, 医学部, 教授 (20025571)