| 研究概要 |
平成3年度に受けた補助金で自記分光々度計,超遠心機分離用ロ-タ,およびクロマトデ-タ処理装置を購入したことにより,本研究は計画通り順調に進行した。すなわち,ネブリンに由来する5種類の分子断片の単離・精製にあたっては超遠心機分離用ロ-タとクロマトデ-タ処理装置によって,また各分子断片とアクチンとの相互作用の送究では自記分光々度計によって良好な結果が得られた。得られた新知見は以下の通りである。1.ネブリン分子の断片化は10μM2以上のCa^<2+>で非酵素的に誘起され,0.1mM.Ca^2の効果が最大となり,200,40および23kDaの分子断片にCa^<2+>が結合すると断片化が起こる。2.Ca^<2+>によって生成した5種類の分子断片の抗体を作成し,間接免疫蛍光法および免疫電子顕微鏡法によりそれらの筋原線椎内局在を追究した結果,ネブリン分子はZ線から細いフィラメントの先端に至る約1cmの長さを有するフィラメントとして存在することが明らかになった。3.各分子断片はいずれもアクチンと結合するので,ネブリン1分子は細いフィラメントの全長に至ってアクチンと側面結合していることがわかった。4.これらのことから,生体内ではネブリン分子が細いフィラメントを構成するアクチンと結合することによって細いフィラメントの構造を安定化しているが,食肉の熟成中にサイトゾルのCa^<2+>が0.1mMに上昇するとネブリン分子の断片化が起こり,細いフィラメント構造の不安定化および筋原線維構造の脆弱化をくと考えられ,これが熟成に伴う食肉の軟化の一要因になっていると結論することができる。
|
