マスト細胞の線維芽細胞依存性増殖機構の解析

1990 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02404030
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 北村 幸彦 大阪大学, 医学部, 教授 (70028520)
• 研究分担者: 尾上 均 大阪大学, 医学部, 助手 (70221166) ; 春日井 務 大阪大学, 医学部, 助手 (80214310) ; 廣田 誠一 大阪大学, 医学部, 助手 (50218856)
• キーワード: マスト細胞 / マスト細胞増殖因子 / CーKit遺伝子 / W遺伝子座 / Sl遺伝子座 / 線維芽細胞

研究概要

マスト細胞の増殖支持機構にはT細胞依存性のものと線維芽細胞依存性のものがある。実際T細胞を欠損するヌ-ドマウスでもマスト細胞数は減少しないところから、少くともマスト細胞の定常的生産には線維芽細胞依存性の機構の方が重要と考えられる.線維芽細胞依存性のマスト細胞増殖機構は、マウスの骨髄細胞をILー3の存在下で浮遊培養することにより得た培養マスト細胞と株化した線維芽細胞を共生培養することにより、しらべることができる。夛くの線維芽細胞株の場合にはマスト細胞と線維芽細胞とが直接的に接触する必要がある.両者の間をミリポア膜で仕切るとマスト細胞は増殖しなくなりやがて死滅する。しかしBALB/3T3線維芽細胞株はミリポア膜で隔てたマスト細胞の増殖を促すことができるから、マスト細胞の増殖田子を分泌していると考えられた。BALB/3T3線維芽細胞の大量培養を行いその培養上清を集めて、FPLCを用い分画した。4種類のカラムを組合せて活性を約1000倍に濃縮した。この分画は正常(+/+)マウス由来のマスト細胞の ^3Hーサイミジンの取り込みを促進したが、W/W^vマウス由来のマスト細胞の ^3Hーサイミジンの取り込みを促さず、W(CーKit)遺伝子座がコ-ドしているレセプタ-に対する増殖因子が、分画中に含まれていることを示唆した。さらに+/+マウス胎児から樹立した線維芽細胞株の培養上清中を濃縮すると、+/+マスト細胞の増殖を促したが、Sl/Sl^dマウス胎児より樹立した線維芽細胞株の培養上清はいくら濃縮しても+/+マスト細胞の増殖を刺激しなかった。つまりSl遺伝子座はW(CーKit)レセプタ-に対する増殖因子そのものをコ-ドしていると考えられた。我々はこの点以上に前進することができなかったが、アメリカ合衆国の3っつのグル-プにより、線維芽細胞由来のマスト細胞増殖因子がクロ-ニングされ、上記の推定の正しさが示された。

研究成果

• [文献書誌] Kitamura,Y.: "Differentiation of mast cells:processes and regulation mechanisms." Acta Haematologica Japonica. 53. 1447-1450 (1990)
• [文献書誌] Matsuda,H.: "Necessity of IgE antibodies and mast cells for manifestation of resistance against larval Haemaphysalis longicornis ticks in mice." Journal of Immunology. 144. 259-262 (1990)
• [文献書誌] Ebi,Y.: "Mechanism of mast cell deficiency in mutant mice of <mi/mi>___ー genotype:an analysis by coーculture of mast cells and fibroblasts." Blood. 75. 1247-1251 (1990)
• [文献書誌] Toyota,N.: "Administration of 8ーmethoxypsoralen and ultraviolet A irradiation (PUVA) induces turnover of mast cells in the skin of C57BL/6 mice." Journal of Investigative Dermatology. 95. 353-358 (1990)
• [文献書誌] Jozaki,K.: "Proliferative potential of murine peritoneal mast cells after degranulation induced by compound 48/80,Substance P,tetraーdecanoylphorbol acetate,or calcium ionophore A23187." Journal of Immunology. 145. 4252-4259 (1990)
• [文献書誌] Jozaki,K.: "Bone marrowーderived cultured mast cells and peritoneal mast cells as target of a growth activity secreted by BALB/3T3 fibroblasts." Experimental Hematology.
• [文献書誌] Kitamura,Y.: "Ontogeny of mast cells.In The Immunology of Fetus" CRC Press (Boca Raton), 320 (1990)
• [文献書誌] Kitamura,Y.: "Differentiation of mast cells and phenotypic change between subpopulations.In Progress in Immunology VII" SpringerーVerlag (Berlin), 1318 (1990)