脳腫瘍悪性度の原因究明と定量化に関する研究

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02404058
• 研究機関: 杏林大学
• 研究代表者: 星野 孝夫 杏林大学, 医学部, 教授 (90010165)
• 研究分担者: 佐和 弘基 杏林大学, 医学部, 助手 (80135912) ; 前田 達浩 杏林大学, 医学部, 講師 (50210993) ; 永松 信也 杏林大学, 医学部, 助教授 (80231489) ; 小松 明男 杏林大学, 医学部, 助教授 (20225569)
• キーワード: 脳腫瘍 / 成長解析 / モノクロ-ナル抗体 / 細胞細胞接着蛋白質 / がん抑制遺伝子 / 成長因子 / 糖輸送担体

研究概要

I.BUdRによる標識を行った脳腫瘍は既に50例を越え、更にBUdR、IUdRによる二重標識法によりグリオ-マでは、組織学的悪性度やLIに拘らず、Ts:平均9時間と計算された。しかし理論的倍化時間はLIと相関して幅広く分散する。細胞世代時間は、48時間以内と推論される。II.P53遺伝子は第17染色体短腕に存在する癌抑制遺伝子で、exon4部におこる正常アミノ酸変位の存在を利用して、PCRーRFLP法によるP53の欠落の有無を検出することができる。100人の血液の解析から、日本人では、欧米人に比しexon4部のHetero型が多く43%に見られることが判明した。33例の脳腫瘍のうち15例がHetero型であり、うち6例(40%)にP53遺伝子の欠落を証明できた。III.糖輸送担体(Glut)の脳腫瘍での発現を分子生物学的に検索し、ヒト星膠細胞腫では、Glutー1は、主に血管内皮細胞のluminal側に局在し、悪性になるとその染色性の低下あるいは消失が観察された。星膠、膠芽腫細胞にて最も発現しているGlutは、Glutー3であった。更に元来、脳組織ではみられないインスリン依存性のGlutー4の発現が認められた。IV.ヒトHistone Hー3蛋白質の塩基配列を基に、PCR法にて約400bpのDNA断片より、DNA及びRNAプロ-ベを作成した。これらのプロ-ベを用いた、Hー3 mRNA in situ hybridization法が、新しい増殖細胞同定法として有用であることを確認した。これと平行し細胞増殖蛋白質として核内に存在するNucleolinも抗血清を作成した。この抗血清は、Nucleolin蛋白質に対してmonoーspecificに反応する。ラット及びハムスタ-細胞では、この抗体は、核小体に強く反応することが示されている。V.細胞細胞接着蛋白質kー3の免疫組織学的局在をラット組織にて検討した。同時にKー3と免疫学的に類似性のあるCーCAM105の発現をラットC6グリオ-マ細胞に認めた。更に、CーCAM105のDNA,RNAプロ-ベを作成し、ラットC6グリオ-マに存在するCーCAM105のcDNAクロ-ニングを試みている。

研究成果

• [文献書誌] Takao Hoshino: "proliferative potential of astrocytomas and glioblastomas" 脳腫瘍病理. 8. 163-166 (1991)
• [文献書誌] 星野 孝夫: "脳腫瘍の細胞増殖能について" 病理と臨床. 9. 620-627 (1991)
• [文献書誌] T Hoshino,S Ito,A Asai,M Sibuya,MD prados,BA Dodson,RL Davis CB Wilson: "Cell Kinetic analysis of human brain tumors by in situ double labelling with bromodesxy widine and ldodeoxyuridine" Int.J.Cancer. 50. 1-5 (1992)
• [文献書誌] 星野 孝夫: "BrdU(bromodeoxyuridine)ー脳腫瘍への応用" 病理と臨床. 9. 826-867 (1991)
• [文献書誌] 鎌田 孝一,佐和 弘基,佐藤 秀子,星野 孝夫: "in situ hybridization法を用いた増殖細胞野同定法" 医学のあゆみ.
• [文献書誌] Takao Hoshino: "K Tabuchi (ed)“Biological Aspects of Brain Tumors"" SpringerーVerlag,Tokyo, 503 (1991)
• [文献書誌] S Shibui,R Nishikawa,K Nomura,K Iwaki,T Maeda,T Hoshino: "K Tabuchi(ed)“Biological Aspects of Brain Tumors"" SpringerーVerlag,Tokyo, 503 (1991)
• [文献書誌] K Nomura,T Hoshino: "II.Applications in clinical oncology.11.CNS Tumors(Adult)" In KD Bauer,RE Duque,TV Shankey(eds),“Flow Cytometry:Principles and clinical Application",Williams & Winkins,Baltimore,
• [文献書誌] T Hoshino: "P Paosetti et al(eds)“NeuroーOncology"" Kluwer Academic Publishers,Dordrecht, 406 (1991)