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本研究では、高等植物の細胞周期の制御機構の解明に向け、リン酸飢餓処理によるニチニチソウ同調培養系、およびオ-キシン飢餓、再添加による同調培養系を用い解析を進めた。その結果、本年度は、以下の成果をあげることができた。1.リン酸飢餓処理における同調培養系を用いた解析においては(1)既に単離したS期特異的遺伝子cyc07のコ-ドするタンパク質に対する抗血清を調整した。この血清を用いて解析した結果、cyc07は非ヒストン核タンパク質をコ-ドしており、このタンパク質は増殖の盛んな細胞の核にのみ存在することを明らかにした。(2)このcyc07に相同な遺伝子が調べたすべての植物種および出芽酵母においても存在し、これらは増殖の盛んな細胞に特異的に発現する。(3)出芽酵母においては相同遺伝子が半数体ゲノム当たり2コピ-存在する。遺伝子破壊によってnull mutationを作製し、その表現系を解析した結果、1コピ-のみの破壊で、増殖の遅延を引き起こし、2コピ-同時に破壊すると致死となることを明らかにした。(4)ニチニチソウのcyc07ゲノムクロ-ンを単離し、プロモ-タ-領域の塩基配列を決定した。また、このプロモ-タ-をレポ-タ-遺伝子と融合させ、アラビドプシスに導入し、トランスジェニック植物を作製した。レポ-タ-の活性を測定することになって、cyc07プロモ-タ-の機能を解析した結果、細胞増殖の盛んな組織においてのみ機能することを確認した。2.オ-キシン飢餓、再添加による同調培養系においては、(1)オ-キシン添加にともなって発現する遺伝子のcDNAクロ-ニングを行なった。これら単離したcDNAの塩基配列を決定したところ、ヒ-トショックプロテイン90に相同な遺伝子、および既にオ-キシンに発現が誘導される遺伝子として、タバコから単離されているparと相同な遺伝子が得られたことが明らかになった。
これら単離した遺伝子について更に解析を進めることによって、高等植物における細胞周期の制御機構の解明に寄与し得るものであると考えられる。
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