オウム病クラミジアの新分類

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02454102
• 研究機関: 岐阜大学
• 研究代表者: 平井 克哉 岐阜大学, 農学部, 教授 (30021702)
• 研究分担者: 松本 明 川崎医科大学, 医学部, 教授 (90027318) ; 山口 剛士 岐阜大学, 農学部, 助手 (70210367) ; 福士 秀人 岐阜大学, 農学部, 助教授 (10156763)
• キーワード: Chlamydia psittaci / 主要外膜蛋白質の遺伝子 / クラミジア属の保存遺伝子

研究概要

これまでの研究からC.psittaiは5つのDNA型に分けられ、さらに各DNA型は主要外膜蛋白質(MOMP)の抗原性により免疫学的に型別されることを明らかにした。今年度は、免疫学的型別において重要な抗原であるMOMPの構造とクラミジア属保存遺伝子領域を解析した(論文2編、裏面)。
MOMPのアミノ酸組成は、Asx.Glx.Gly.SerおよびAlaが各々約10%(mol%)、Leu他5種は約5%、Alg他3種は約3%、CysおよびMetは約1%であった。MOMPは8本のペプチドフラグメント(F)に分かれた。MOMPのN末端アミノ酸配列は、NーLou Pro Val Gly Asp Pro Ala Glu Pro SerーCであった。この配列から、5'TTGCCTGTAGGGAATCCAGCTGAACCAAGT3'のオリゴヌクレオチドを作成し、MOMP遺伝子をクロ-ニングした、この合成オリゴヌクレオチドをプロ-ブして解析した結果、MOMP遺伝子座位のDNA断片の大きさは各DNA型とよく一致することが判った。しかし、Av2aは他のAv型と違いが認められた。また、同じDNA型の中でも塩基配列に変化が存在することが示唆された。6.1kbプロ-ブによるサザンブロッティングにより、Av型は、FelとGplに共通の塩基配列を持つものの、哺乳類由来株、C.pneumoniaeおよびC.pneumoniaeとには大きな違いがあることが示唆された。(論文1編、裏面)
クラミジア属保存領域について塩基配列の決定およびノ-ザンブロッティングをおこなったところ、この領域には16Sおよび23Sリボゾ-ムRNA(rRNA)遺伝子が存在することがわかった。また、このrRNA遺伝子を含む領域の制限酵素断片長多型(RFLP)は、DNA型およびDNAホモロジ-グル-プとよく一致し、rRNAないしrDNAグル-プの分類学的有用性が示唆された。GCPー1株MOMPの抗原部位は、機成アミノ酸配列に変化の多い4つの可変領域(VD)のうち、FDII領域を含む範囲に5カ所、VDIII領域を含む範囲に1カ所、およびいずれのVD領域にも属さない範囲に1カ所見い出された。VDII領域に多くの抗原部位が存在すること、およびVDII領域に中和活性を持つ抗原部位が存在することが明らかになった。この結果は、C.trachomatisのVDIIおよびIV領域に抗原部位が多く存在し、特にVDIV領域に中和活性を持つ抗原部位が存在する成績とは異なっていた。従って、C.psittaciの属、種、型、亜型および株間における抗原決定基はC.trachomatisのそれと異なる領域にあることを示唆しており、今後詳細な解析が必要であろう。今後、各DNA型のrRNA遺伝子およびその隣接領域の塩基配列を決定し、クラミジア属全体の再編成の基盤を確立したい。

研究成果

• [文献書誌] Hideto FUKUSHI,and Katsuya HIRAI.: "Proposal of Chlamydia pecorum sp.nov for Chlamydia sp.strains dirived from ruminants." International Journal of Systematic Bacteriology.(1992)
• [文献書誌] Atsushi KIKUTA,Nahotaka FURUKAWA,Tetsuya YOSHIDA,Hideto FUKUSHI,Tsuyoshi YAMAGUCHI,and Katsuya HIRAI.: "Antigenic Analysis of Avian Chlamydia psittaci using using Monoclonal Antibodies to the Major Outer Membrane Protein." The Journal of Vererinary Medical Science.53(3). 385-389 (1991)
• [文献書誌] M.Nabeya,K.Kaneko,H.Ogino,D.Nakabayashi,T.Watanabe,J.Murayama,K.Hayashi,H.Fukushi,T.Yamaguchi,K.Hirai,Y.Inaba,and M.Matsumoto.: "Abortion in Japanese cows caused by Chlamydia psittaci." Veterinary Microbiology. 29. 261-265 (1991)
• [文献書誌] Shinichi KOBAYASHI,Takayuki MORISHITA,Takashi MIYAKE,Hidito FUKUSHI,Katsuya HIRAI,Yuichi ISYIHARA,and Shin ISOMURA.: "Prevalence of Chlamydia pneumoniae in Japan." The Journal of Infectious Diseases.163(2). 417-418 (1991)
• [文献書誌] Akira MATSUMOTO,Hiroko BESSHO,Kenzo UEHIRA and Taiji SUDA.: "MorphologicalStudies of the Association of Mitochondria with Chlanydial Inclusions and the Fusion of Chlamydial Inclusions." Journal of Electron Microscopy.40. 356-363 (1991)
• [文献書誌] Hiroshi MATSUNO,Hidito FUKUSHI,Tsuyoshi YAMAGUCHI,and Katsuya HIRAI.: "Antigenic Analysis of Feline and Bovine Chlanydia psittaci with Monoclonal Antibodies." The Journal of Veterinary Medical Science.53(2). 173-179 (1991)
• [文献書誌] 平井 克哉: "愛玩鳥の医学" 学窓社, 285 (1990)