1991 年度実績報告書

ジストロフインとその関連タンパクの精製・同定とそれらの病態機能の研究

研究課題

研究課題/領域番号	02454160
研究機関	国立精神・神経センター
研究代表者	小沢〓二郎国立精神神経センター, 神経研究所・機能研究部, 部長 (20014178)
研究分担者	林謙介国立精神神経センター, 神経研究所・機能研究部, 研究員 (50218567) 萩原康子国立精神神経センター, 神経研究所・機能研究部, 研究員 (00175530) 吉田幹晴国立精神神経センター, 神経研究所・機能研究部, 室長 (70111151)
キーワード	ジストロフィン / ジストロフィン結合タンパク質 / 筋ジストロフィ- / タンパク質生化学
研究概要	われわれは筋細胞膜の裏打ちタンパクであるジストロフィンの分子構造を明らかにするために、タンパク質分解酵素によるペプチドマップの分析を行った。すなわち兎精製ジストロフィンをカルパインで部分分解を行い電気泳動上31K、48K、94K、145K、100K、64K等のバンドを得た。これをブロットし、免疫染色を行ってそのフラグメントのジストロフィン分子上の位置を決めたところN端からC端について上記の順序で並んでいた。145Kフラグメントには二種類存在し、それぞれのN端のアミノ酸配列によりアミノ酸番号691と1993のところに切断点があることが分かった。1993番から145KだけC端側にも切断点があり、それよりもC端側の約300残基位はかなり切れ易く細いことは不明であった。これらの切断点は分子のヘリクス構造が割合ゆるい所かコイル構造をしていることが推定された。これらの研究の間にジストロフィンを細胞膜に付着させている糖タンパク質複合体と結合する位置はジストロフィンのシスティンリッチドメインとC端ドメインの前半であることを証明した。この位置は臨床的にはその部分の欠失が重篤な症状を呈することが遺伝子解析の方から指摘されていた部分である。このことは筋ジストロフィ-の病態生理に深くかゝわっていると考えられる。この点を更に明らかにするために、これらの複合体を形成するタンパク質を部分分解してそのフラグメントのアミノ酸配列を明らかにした。それにもとずいて現在米国ハ-バ-ド大kunkel教授と共同でクロ-ニング中である。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] 田中光,石黒恒男,江口新比古,斎藤加代子,小沢〓二郎: "Expression of a dystrophinーrelated protein associated with the skeletal muscle cell membrane" Histochemistry. 96. 1-5 (1991)
[文献書誌] 小沢〓二郎,吉田幹晴,萩原康子,田中光,林謙介,池谷紀代子: "Formation of dystrophin lining on muscle cell membrane in myogenesis in vivo" Frontiers in muscle research. 305-319 (1991)
[文献書誌] 田中光,林謙介,小沢〓二郎: "Positive immunostaining with dystrophin antibodies in mdx skeletal muscle" Proceedings of the Japan Academy. 67. 148-152 (1991)
[文献書誌] 池谷紀代子,斎藤加代子,林謙介,田中光,萩原康子,吉田幹晴,山内朱美,福山幸夫,石黒恒男,江口新比古,小沢〓二郎: "Molecular genetic and immunohistochemical analysis of dystrophin of a young patient with Xーlinked muscular dystrophy" American Journal of Medical Genetics.
[文献書誌] 鈴木厚,吉田幹晴,小沢〓二郎: "Glycoproteinーbinding site of dystrophin is cofined to the cysteineーrich domain and the first half of the carboxyーterminal domain"
[文献書誌] 吉田幹晴,鈴木厚,小沢〓二郎: "Analysis of molecular structure of dystrophin"

1991 年度 実績報告書

ジストロフインとその関連タンパクの精製・同定とそれらの病態機能の研究

研究代表者

小沢 〓二郎 国立精神神経センター, 神経研究所・機能研究部, 部長 (20014178)

研究成果

[文献書誌] 田中 光,石黒 恒男,江口 新比古,斎藤 加代子,小沢 〓二郎: "Expression of a dystrophinーrelated protein associated with the skeletal muscle cell membrane" Histochemistry. 96. 1-5 (1991)

[文献書誌] 小沢 〓二郎,吉田 幹晴,萩原 康子,田中 光,林 謙介,池谷 紀代子: "Formation of dystrophin lining on muscle cell membrane in myogenesis in vivo" Frontiers in muscle research. 305-319 (1991)

[文献書誌] 田中 光,林 謙介,小沢 〓二郎: "Positive immunostaining with dystrophin antibodies in mdx skeletal muscle" Proceedings of the Japan Academy. 67. 148-152 (1991)

[文献書誌] 鈴木 厚,吉田 幹晴,小沢 〓二郎: "Glycoproteinーbinding site of dystrophin is cofined to the cysteineーrich domain and the first half of the carboxyーterminal domain"

[文献書誌] 吉田 幹晴,鈴木 厚,小沢 〓二郎: "Analysis of molecular structure of dystrophin"

1991 年度実績報告書

小沢〓二郎国立精神神経センター, 神経研究所・機能研究部, 部長 (20014178)

[文献書誌] 田中光,石黒恒男,江口新比古,斎藤加代子,小沢〓二郎: "Expression of a dystrophinーrelated protein associated with the skeletal muscle cell membrane" Histochemistry. 96. 1-5 (1991)

[文献書誌] 小沢〓二郎,吉田幹晴,萩原康子,田中光,林謙介,池谷紀代子: "Formation of dystrophin lining on muscle cell membrane in myogenesis in vivo" Frontiers in muscle research. 305-319 (1991)

[文献書誌] 田中光,林謙介,小沢〓二郎: "Positive immunostaining with dystrophin antibodies in mdx skeletal muscle" Proceedings of the Japan Academy. 67. 148-152 (1991)

[文献書誌] 鈴木厚,吉田幹晴,小沢〓二郎: "Glycoproteinーbinding site of dystrophin is cofined to the cysteineーrich domain and the first half of the carboxyーterminal domain"

[文献書誌] 吉田幹晴,鈴木厚,小沢〓二郎: "Analysis of molecular structure of dystrophin"