交差反応性イディオタイプ陽性T細胞抗原リセプタ-の分子免疫学的研究

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02454188
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 栗林 景容 京都大学, 医学部, 助手 (10064578)
• 研究分担者: 渡部 好彦 京都大学, 薬学部, 助教授 (90109075) ; 山岸 秀夫 京都大学, 理学部, 助教授 (90025429)
• キーワード: 腫瘍免疫 / CTL / TCR / idiotype / 体細胞突然変異

研究概要

フレンドウイルス誘発腫瘍FBLー3に対する同系B6マウスのCTL反応系では、抗TCR交差反応性イディオタイプモノクロ-ナル抗体N9ー127と反応性を有するCTLが高頻度に出現する。この抗体で認識されるイディオタイプ(127Id)陽性TCRは全てVα1Jα112ー2/Vβ10Dβ2.1Jβ2.7から成るα鎖β鎖から構成されていた。しかしV(D)J結合部領域の塩基配列は個々のクロ-ンで異なっていたものの、推定されるアミノ酸配列はよく保存されており、127Id陽性CTLクロ-ンはVβ鎖のN末より99番目のアミノ酸がグリシンがアスパラギン酸である2群に分類されることが判明した。前者に属するクロ-ンは後者に比較しより低能度(約1/25)のN9ー127抗体でその細胞障害活性が阻止された。
127Id陽性CTLクロ-ンのTCRVα鎖、Vβ鎖に体細胞突然変異がみられるか否かを、生殖細胞型Vα1、Vβ10を分離し比較した結果、解析した8クロ-ンに使用されているVβ10は生殖細胞型とまったく同一の塩基配列を示した。一方Vα1については、2クロ-ンでリ-ダ-部位、CDR1ー3に相当する領域に塩基の置換が存在し、体細胞突然変異の存在する事が示唆された。
127Idを発現するCTLが生体内で実際にFBLー3腫瘍の距絶に作用しているであろうことを、腫瘍塊浸潤リンパ球には127Id陽性CTLのα鎖、β鎖と同一のあるいは類似したTCR遺伝子が使用されている事をPCR法を用いて明らかにした。
この127Id陽性集団の他にも特定のTCRα鎖、β鎖から構成され、個体レベルでみた場合クロ-ナルに増殖し高頻度に発現するCTL集団があり、FBLー3に特異的なこのようなCTLがどのような腫瘍抗原を認識しているかについて解析中である。

研究成果

• [文献書誌] Y.Matsubayashi: "Participation of a dominant cytotoxic T cell population defined by amonoclonal antibody in syngeneic antiーtumor responses." European Journal of Immunology. 20. 2095- (1990)
• [文献書誌] T.Hirama: "Conserved V(D)J junctional sequence of crossーreactive cytotoxic receptor idiotype and the effect of a single amino acid substitution." European Journal of Immunology. 21. 483- (1991)
• [文献書誌] M.Suzuki: "Expansion of murine T cells bearing a unique TCR βーchain in Friend virusーinduced tumor in situ." Journal of Immunology.
• [文献書誌] 中山 睿一: "腫瘍特異的キラ-T細胞におけるTCRイディオタイプの解析" 細胞工学. 9. 702-706 (1990)
• [文献書誌] 栗林 景容: "キラ-T細胞" 腫瘍免疫研究update(中外医学社).
• [文献書誌] 栗林 景容: "T細胞レパトアとガン" 細胞工学.
• [文献書誌] K.Kuribayashi: "Dominant idiotype in tumorーspecific cytotoxic Tーlymphocyte response.In “Idiotype Networks in Biology and Medicine",p181ー185,A.D.M.E.Osterhaus and F.G.C.M.Uytdehaag,edt." Elsevier Science Publishers B.V., (1990)