| 研究課題/領域番号 |
02454339
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
阿部 周一 北海道大学, 理学部, 助教授 (80125278)
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| 研究分担者 |
野島 孝之 北海道大学, 医学部, 講師 (50142732)
松野 丈夫 北海道大学, 医学部, 助教授 (10165847)
吉田 廸弘 北海道大学, 理学部, 教授 (60001765)
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| キーワード | 骨軟部悪性腫瘍 / 横紋筋肉腫 / ユーイング肉腫 / 特異的染色体転座 / 微小核融合 / 造腫瘍性検索 / 遺伝子再配列 |
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| 研究概要 |
昨年度までに樹立した横紋筋肉腫株16例とユーイング肉腫株4例において、今年度は以下の結果を得た。
1)昨年度までに作成したヒト単一染色体保持マウス細胞クローンパネルからサイトカラシンB処理により微小核を作成し、胞巣型横紋筋肉腫のt(2;13)転座またはユーイング肉腫のt(11;22)転座保持細胞株と融合することにより、それぞれに単一2番染色体または11番染色体の移入を試みた。t(11;22)保持細胞への11番染色体の移入は、微小核の融合効率が悪く成功しなかった。一方、2番染色体の移入は1例のt(2;13)保持細胞株において成功し、8クローンが得られた。このうち、2つのクローンの造腫瘍性をヌードマウスにおいて検討したが、いずれも造腫瘍性を失うことはなかった。
2)t(2;13)転座切断点および近傍の遺伝子DNAプローブを用いたサザーン解析と染色体in situハイブリダイゼーションにより、この転座の切断点は、FN1(フィブロネクチン)とCOL6A3(コラーゲンIV型α3)遺伝子の間にあることが示唆された。なお、D2S3、FN1は、今回調べた11例の横紋筋肉腫では、転座の有無に係わらずRFLPsや再構成は認められなかった。一方、COL6A3、MYL1-3(ミオシン軽鎖)、ALPP(胎盤型アルカリフォスファターゼ)遺伝子は、11例中1例の正常核型症例でRFLPsが認められ、また、転座を持たない他の1例でもALPPにRFLPsが認められた。しかし、残りの症例ではこれらの遺伝子に変化がなかった。
3)t(11;22)転座切断点の解析により、11q23のFLI1と22q12のEWS遺伝子がユーイング肉腫4例中2例の転座症例において再配例していることが分かり、昨秋のフランスのグループによる報告を確認できた。ただ、RNAを用いたRT-PCR解析により新たな切断部位が1例に見つかり、両遺伝子の切断点は予想より広い領域に分布することが分かった。
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