ヒト胎盤アミノペプチダ-ゼの生理的意義の解明

1990 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02454378
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 水谷 栄彦 名古屋大学, 医学部, 助教授 (00159162)
• 研究分担者: 倉内 修 名古屋大学, 医学部, 助手 (80195528) ; 春日井 正秀 名古屋大学, 医学部, 助手 (00185787) ; 友田 豊 名古屋大学, 医学部, 教授 (60023769)
• キーワード: 胎盤性ロイシン・アミノペプチタ-ゼ / オキシトシナ-ゼ / アミノペプチダ-ゼA / オキシトシン / ワゾプレッシン / アンジオテンシン / アミノペプチダ-ゼB / ベスタチン

研究概要

妊婦血中(胎盤後血)から硫安分画ブル-セファロ-ス、DEAE、フェニ-ルセファロ-ス、セファクリルSー200のカラムによりPーLAP(オキシトシナ-ゼ)を約3000倍精製し、単一蛋白にした。精製PーLAPは糖蛋白であり、その分子量は21万であることが明らかになった。精製PーLAPによる各種ペプチドホルモンの分解を検討したところ、PーLAPはワゾプレッシン、オキシトシン、アンジオテンシンIIIを分解することがペプチドホルモンから分解遊離するアミノ酸をHPLCで定量することにより判明した。また、PーLAPとシスチンアミノペプチダ-ゼ(CAP)が同一のものであることも酵素化学的性質が一致することから明らかになった。現在PーLAPのアミノ酸のシ-クエンスを検討中である。
2.胎盤分画(膜、可溶性、リソゾ-ム)におけるオキシトシン分解をオキシトシンと各分画をインキュ-ベトし、オキシトシンから分解遊離されるアミノ酸を定量し検討した。同時に各種酵素阻害剤(ベスタテン、ピュロマイシン、アマスタテン、フオスフオラミドンなど)によるオキシトシン分解能への影響も検討し、胎盤分画に存在するオキシトシナ-ゼの酵素学的性質を検討した。
3.胎盤に存在するアンジオランシナ-ゼであるアミノペプチタ-ゼAを胎盤膜分画からDEAE、イムノアフィニテイ-、ベスタチンアフィニテイ-、BioーgelAなどカラムにて精製し、ほぼ単一蛋白にまで精製し、現在そのアミノ酸のシ-クエンスを検討している。
4.胎盤可溶性分画からアミノペプチダ-ゼBをDEAE、ヒドロキシアルアパタイト、BioーgelAなどのカラムにて精製し、胎盤アミノペプチダ-ゼBの酵素学的性質を明かにした。

研究成果

• [文献書誌] O.Kurauchi,S.Mizutani S.Nomura,M.Furuhashi,M.Kasugai and Y.Tomoda: "Changes in the binding of angiotensin II to rat placental receptor by estrogen and progesterone" Horm.metabol.Res.21. 558-560 (89)
• [文献書誌] Y.Ito,S.Mizutani,S.Nomura,O.Kurauchi,M.Kasugai,O.Narita and Y.Tomoda: "Increased serum Kininase I activity in pregnancy Complicated by preーeclampsia" Horm.metabol.Res.22. 252-255 (90)
• [文献書誌] O.Kurauchi,S.Mizutani,S.Nomura,M.Kasugai,O.Narita and Y.Tomoda: "A comparison of the binding of angiotensin II(AーII)to human placenta between normal and severe preーeclamptic pregnancy" Journal of Medicine. 21. 209-216 (90)
• [文献書誌] S.Nomura,S.Mizutani,O.Kurauchi,M.Kasugai,O.Narita and Y.Tomoda: "Effects of low molecular weight peptides and divalent cations on degradation and binding of angiotensin II" Horm.metabol.Res.22. 444-448 (90)
• [文献書誌] Y.Asada,S.Komura,N.Ohishi,M.Kasugai,NSuganuma,S.Mizutani,O.Narita,Y.Tomoda.: "Effect of ovarietomy on serum lipid peroxide levels in women" J.Clin.Biochem.Nutr.8. 247-252 (90)
• [文献書誌] J.W.Wright,S.Mizutani,C.E.Murray,H.Z.Amir and J.W.Harding: "Aminopeptidaseーinduced elevations and reduction in blood pressure in the spontoneously" J.Hypertension. 8. 969-974 (90)