1990 年度実績報告書

染色体高精度解析の技法改良と、その遺伝子マッピングへの応用

研究課題

研究課題/領域番号	02454492
研究機関	東京医科歯科大学
研究代表者	池内達郎東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助教授 (90041839)
研究分担者	吉田光明東京医科歯科大学難治疾患研究所, 助手 (60182789) 斎藤深美子東京医科歯科大学難治疾患研究所, 助手 (10158917)
キーワード	染色体高精度分染法 / 遺伝子マッピング / リンパ芽球細胞株 / ダウン症候群 / HMC症候群 / 神経線維腫症第2型 / イヌ染色体 / in situハイブリダイゼ-ション
研究概要	[1]既存の高精度染色体分染法(細胞同調培養法,染色体凝縮抑制法など)の各種培養細胞系への汎用性を検討した.1)臭化エチジウム(EB)による染色体凝縮抑制効果を利用した方法は、増殖能の高い腫瘍細胞株に対しては処理条件を改変する(コルセミド処理を短かく、EB濃度を通常より低くする)ことにより適用可能であることを認め、腎癌細胞株の染色体構造異常の解析に資した.2)リンパ芽球細胞株にメソトレキセ-ト(MTX)による細胞同調法を適用した場合に好結果が得られないのは,MTX解除後に分裂期に入る迄の時間(6.5ー7.5時間)が遅いためであることを認めた.3)イヌ(Canis familiaris)の血液培養にMTX同調ーBrdU処理法を適用して高精度Rーバンドを検出させることによって76個の全染色体の同定を可能とし、高精度Rバンドパタ-ンの模式図作製に貢献した. [2]EB法を用いて各種の染色体構造異常の高精度バンド解析を行い、次のような疾患遺伝子(領域)座の領域マッピングに貢献した.ダウン症関連領域(4/21転座由来の部分トリソミ-の解析):22q22.2→gter.HMC症候群(1/7転座の解析):1q31.2又は7p15.1ーp15.3.神経線維腫症第2型(4/22転座例及び22qの部分欠損例の解析):22q11.23ーq12.2. [3]遺伝子領域マッピングに貢献できた上記染色体異常の他に、21番環状染色体を始めとする数種の染色体異常保有者に由来したリンパ芽球細胞株を昨年度に引きつづき樹立し、凍結保存した. [4]ビオチン標識したDNAプロ-ブによるin situハイブリダイゼ-ション法と高精度分染法との併用を試みる第一段階として、18番の偽二動原体染色体を解析し、不活化動原体部にもアルファサテライトDNAをプロ-ブとして検出できるセントロメアDNAが残存していることを確認した.

研究成果
(9件)

すべてその他

すべて文献書誌 (9件)

[文献書誌] Ikeuchi T,Yamamoto K,Qiao F,Hayakawa K,et al.: "Ring chromosome 21 transmitted from mother to daughter:its stability in a lymphoblastoid cell line." Annales de Genetique. 33. 32-35 (1990)
[文献書誌] Korenberg JR,Kawashima H,Pulst SM,Ikeuchi T,et al.: "Molecular definition of a region of chromosome 21 that causes features of the Down syndrome phenotype." American Journal of Human Genetics. 47. 236-246 (1990)
[文献書誌] Poulsen BS,Shibasaki Y,Ikeuchi T,& Ronne M.: "Banding studies in Canis familiaris.I.Replication patterns in karyotypes from lymphocyte cultures." Cytobios. 62. 161-165 (1990)
[文献書誌] 武部啓・編,池内達郎: "Highーresolution banding(高精度分染)" ヒト培養細胞および染色体診断マニュアル(講談社サイエンティフィク). 57-64 (1990)
[文献書誌] 武部啓・編,池内達郎・吉田光明: "コンピュ-タ-による染色体解析" ヒト培養細胞および染色体診断マニュアル(講談社サイエンティフィク). 160-167 (1990)
[文献書誌] 池内達郎: "高精度バンディングによる遺伝子マッピング" 代謝(臨時増刊号)「先端のバイオサイエンス」. 27. 383-391 (1990)
[文献書誌] 荻田善一・監;梶井正・松田一郎・山村研一・編;新川詔夫・池内達郎: "連鎖と組換え" 医科遺伝学(南江堂). 16-19 (1991)
[文献書誌] 荻田善一・監;梶井正・松田一郎・山村研一・編;池内達郎: "染色体地図" 医科遺伝学(南江堂). 219-228 (1991)
[文献書誌] 荻田善一・監;梶井正・松田一郎・山村研一・編;池内達郎: "ヒト染色体上にマッピングされた遺伝子一覧" 医科遺伝学(南江堂). 415-436 (1991)

1990 年度 実績報告書

染色体高精度解析の技法改良と、その遺伝子マッピングへの応用

研究代表者

池内 達郎 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助教授 (90041839)

研究成果

[文献書誌] Ikeuchi T,Yamamoto K,Qiao F,Hayakawa K,et al.: "Ring chromosome 21 transmitted from mother to daughter:its stability in a lymphoblastoid cell line." Annales de Genetique. 33. 32-35 (1990)

[文献書誌] Korenberg JR,Kawashima H,Pulst SM,Ikeuchi T,et al.: "Molecular definition of a region of chromosome 21 that causes features of the Down syndrome phenotype." American Journal of Human Genetics. 47. 236-246 (1990)

[文献書誌] Poulsen BS,Shibasaki Y,Ikeuchi T,& Ronne M.: "Banding studies in Canis familiaris.I.Replication patterns in karyotypes from lymphocyte cultures." Cytobios. 62. 161-165 (1990)

[文献書誌] 武部 啓・編,池内 達郎: "Highーresolution banding(高精度分染)" ヒト培養細胞および染色体診断マニュアル(講談社サイエンティフィク). 57-64 (1990)

[文献書誌] 武部 啓・編,池内 達郎・吉田 光明: "コンピュ-タ-による染色体解析" ヒト培養細胞および染色体診断マニュアル(講談社サイエンティフィク). 160-167 (1990)

[文献書誌] 池内 達郎: "高精度バンディングによる遺伝子マッピング" 代謝(臨時増刊号)「先端のバイオサイエンス」. 27. 383-391 (1990)

[文献書誌] 荻田 善一・監;梶井 正・松田 一郎・山村 研一・編;新川 詔夫・池内 達郎: "連鎖と組換え" 医科遺伝学(南江堂). 16-19 (1991)

[文献書誌] 荻田 善一・監;梶井 正・松田 一郎・山村 研一・編;池内 達郎: "染色体地図" 医科遺伝学(南江堂). 219-228 (1991)

[文献書誌] 荻田 善一・監;梶井 正・松田 一郎・山村 研一・編;池内 達郎: "ヒト染色体上にマッピングされた遺伝子一覧" 医科遺伝学(南江堂). 415-436 (1991)

1990 年度実績報告書

池内達郎東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助教授 (90041839)

[文献書誌] 武部啓・編,池内達郎: "Highーresolution banding(高精度分染)" ヒト培養細胞および染色体診断マニュアル(講談社サイエンティフィク). 57-64 (1990)

[文献書誌] 武部啓・編,池内達郎・吉田光明: "コンピュ-タ-による染色体解析" ヒト培養細胞および染色体診断マニュアル(講談社サイエンティフィク). 160-167 (1990)

[文献書誌] 池内達郎: "高精度バンディングによる遺伝子マッピング" 代謝(臨時増刊号)「先端のバイオサイエンス」. 27. 383-391 (1990)

[文献書誌] 荻田善一・監;梶井正・松田一郎・山村研一・編;新川詔夫・池内達郎: "連鎖と組換え" 医科遺伝学(南江堂). 16-19 (1991)

[文献書誌] 荻田善一・監;梶井正・松田一郎・山村研一・編;池内達郎: "染色体地図" 医科遺伝学(南江堂). 219-228 (1991)

[文献書誌] 荻田善一・監;梶井正・松田一郎・山村研一・編;池内達郎: "ヒト染色体上にマッピングされた遺伝子一覧" 医科遺伝学(南江堂). 415-436 (1991)