| 研究課題/領域番号 |
02557031
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| 研究機関 | 新潟大学 |
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研究代表者 |
山内 春夫 新潟大学, 医学部, 教授 (30134919)
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| 研究分担者 |
出羽 厚二 新潟大学, 医学部, 助手 (10197832)
内藤 笑美子 新潟大学, 医学部, 助手 (80018811)
木南 凌 新潟大学, 医学部, 教授 (40133615)
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| キーワード | DNAフィンガ-プリント / コ-ルド法 / パ-オキシダ-ゼ標識法 / myoプロ-ブ |
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| 研究概要 |
DNAフィンガ-プリント法は、アイソト-ププロ-ブを用いていたため、どこででも行えるという訳にはいかず、非アイソト-ププロ-ブによるコ-ルド法が実用化に不可欠であった。これまで、我々は、タカラのケミプロ-ブ(スルフオン化標識法)、アマシヤムのECL遺伝子検出システム(パ-オキシダ-ゼ標識法)など、4種類の市販のコ-ルドラベリングキットを用いたDNAフィンガ-プリントを作成し、検出感度も実用に十分なものであることを確認している。本研究では、このうち最も実用性が高いと考えたECL遺伝子検出システムの感度をさらに上げるための研究を行い、同時に、本検出法を中心にコ-ルド法によるDNAフィンガ-プリントを、誰もが作成できるようにすることを目的としている。
上記目的のため、当研究室で作成したマニュアルに従い、共通のプロ-ブを使用し、13の他大学に協力してもらい次の実験を試みた。
1)当教室でDNAをブロットしたメンブランフィルタ-からmyoプロ-ブを用いてDNAフィンガ-プリントを作成する。
2)当教室で抽出したDNAを用いてDNAフィンガ-プリントを作成する。
3)各施設で任意の3名から抽出したDNAを用い、サザンハイブリダイゼ-ション法によりmyoプロ-ブでDNAフィンガ-プリントを作成する。
いずれの施設からも結果を提出してもらい、現在フィルム上に検出されたDNAバンドの解析を行ってDNAフィンガ-プリントの各ステップでの問題点や改良点を検討中である。
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