前立腺由来の骨形成促進因子の同定およびその骨粗鬆症治療への応用

1990 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02557111
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 松本 俊夫 東京大学, 医学部, 講師 (20157374)
• 研究分担者: 岡田 昌宏 帝人生物医学研究所, 研究員 ; 杉山 孝 帝人生物医学研究所, 主任研究員 ; 原田 俊一 東京大学, 医学部, 助手 (70228641)
• キーワード: 前立腺 / 骨形成因子 / 成長因子 / 骨粗鬆症

研究概要

前立腺癌や前立腺肥大症の前立腺組織中には、強力な骨形成促進活性が存在する。そこで、この前立腺由来の骨形成促進因子を同定すると共にその作用を解明し、ひいては老人性骨粗鬆症患者の治療への応用をはかることを目的として以下の検討を進めた。
1.骨形成促進因子の精製:前立腺肥大症患者より採取した前立腺組織の尿素抽出物をイオン交換および逆相HPLCにより、粗精製し、三つの骨形成促進活性および線維芽細胞のprogressio活性を有するピ-クを得た。そこで、今回新たに購入したFPLCを用い、ゲル濾過カラムなどによりprogression活性を指標としてこのうちピ-ク1の精製を進めた。そして、SDSーPAGE上の主バンドのアミノ酸部分構造を決定した。その結果、検討した中間部6個およびC端部6個、計12個全てのアミノ酸配列がangiogeninのそれと一致した。一方、ピ-ク2および3についても同様に精製が進めたが、単一の蛋白として同定するには至っていない。
2.骨形成活性の評価:骨形成促進活性は、骨芽細胞の増殖促進活性および石灰化促進活性により評価したが、Angiogeninの骨形成および増殖促進活性をin vitroで検討した結果からは、これらの作用は殆ど認められなかった。一方、異所性骨化を指標したin vivoでの骨形成能の検討では、強力ではないもののbone morphogenetic protein(BMP)と類似した骨誘導活性の存在が認められた。そこで更に、前立腺抽出物中の骨誘導活性についてin vivoで再評価を進めると同時に、抗BMP抗体を用いたWestern blot解析により、前立腺組織抽出物中のBMPの存在について検討を進めている。

研究成果

• [文献書誌] Takeuchi,Y,et al.: "Isolation and characterization of proteoglycans synthersized by mouse osteoblastic cells in culture during mineralization process." Biochemical Journal. 266. 15-24 (1990)
• [文献書誌] Fukagawa,M,et al.: "Regression of parathyroid hyperplasia by calcitriolーpulse therapy in patients on longーterm Iialysis" New England Journal of Medicine. 323. 421-422 (1990)
• [文献書誌] Matsumoto,T.et al.: "Stimulation by 1.25ーdihydroxyvitamin D_3 of in vitro mineralization induted by osteoblastーlike MC3T3ーE1 cells." Bone.12. in-press (1991)
• [文献書誌] Motokura,T.et al.: "Parathyroid hormoneーrelated protein in adult Tーcell leukemia/lymphoma" Annds of Internal Medicine. 111. 484-488 (1989)
• [文献書誌] Hakeda,Y.et al.: "Existence of parathyroid hormone binding sites on murine hemopoietic blast cells." Biochemical and Biophysical Research Communications. 163. 1481-1486 (1989)
• [文献書誌] Takeuchi,Y.et al.: "1.25ーDihydroxyvitamin D_3 inhibits synthesis and enhancs degradation of proteoglycans in osteoblastic cells." Journal of Biological Chemistry. 264. 18407-18413 (1989)
• [文献書誌] Matsumoto,T.et al.(分担執筆): "Bone Morphometry" Nishimura Co.Niigata,Japan/SmithーGordon & Co.London,UK, 611 (1990)
• [文献書誌] Matsumoto,T.et al.(分担執筆): "Calcium Regulation and Bone Metabolism" Elsevier Science publishers, 508 (1990)