| 研究概要 |
ダイコン、カブ、カイラン等のプロトプラスト培養:ダイコン8品種、カブ3品種、カイラン、及びキャベツ、ハクサイ、カリフラワ-、ブロッコリを供試してプロトプラスト培養を試みた。各植物の5日令の無菌の実生の子葉を細断し、酵素溶液(セルラ-ゼYC,ペクトリア-ゼYー23,MESバッファ-、マニト-ル、ペレティエ-(1983)のB培地)中でプロトプラストを単離した。培養の為に、B培地を用いてコロニ-を形成させ、やはり同じペレティエ-のC培地に移植してカルス形成を誘導し、数回移植してカルスを反殖させた後、E培地に移植して苗条再分化させた。カルス、根分化はいずれの品種でも見られたが、苗条再分化はダイコン1品種、カブ2品種、及びその他の総ての品種で成功した。
カイラン、パクチョイ、チンゲンサイ、アブラナ、タカナ、赤キャベツ、守口ダイコンのカルス培養:まだ試みていないカイラン、パクチョイ、チンゲンサイ、タカナと、比較として既に成功しているアブラナ、赤キャベツ、守口ダイコンを供試してカルス培養を行った。各種子をエタノ-ル、アンチホルミンで表面殺菌した後、MS培地に播種し、5日令の実生の胚軸を3ミリに切って外植体とした。種々の濃度の2,4ーDとBAを添加したMS培地に外植体を植え付けたところ、総ての外植体でカルスを形成し、さらに2,4ーD低濃度区でカイランと赤キャベツで苗条が再分化した。培養1か月後、1mg/1BA添加培地にカルスを移植したところ、チンゲンサイ以外の総てのカルスから苗条が再分化した。根は総ての外植体から再分化した。
カイランの電気的細胞融合:カイランからのプロトプラストを前述の方法で単離し、BM機器のBTXエレクトロセルマニピュレ-タ-(ECMー200)で融合条件を確定した。接着は5×10^5の密度で10V、75秒のパルスで、融合は500Vを30μs2回のパルスを与えることで最も効果的に出来た。
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