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1991 年度 研究成果報告書概要

酢酸菌呼吸鎖におけるアルコ-ルおよびメタノ-ル脱水素酵素の機能と特性

研究課題

研究課題/領域番号 02660122
研究種目

一般研究(C)

配分区分補助金
研究分野 応用微生物学・発酵学
研究機関山口大学

研究代表者

松下 一信  山口大学, 農学部, 助教授 (50107736)

研究期間 (年度) 1990 – 1991
キーワードメタノ-ル脱水素酵素 / アルコ-ル脱水素酵素 / ピロロキノリンキノン(PQQ) / 酢酸菌 / メチロトロ-フ
研究概要

(1)メタノ-ル資化性酢酸菌Acetobacter methanolicusのメタノ-ル酸化系呼吸鎖とエタノ-ル酸化系呼吸鎖:本菌はグリセロ-ルを炭素源として培養すると強いエタノ-ル酸化活性を、メタノ-ルで培養するとメタノ-ル酸化活性を示す。このエタノ-ル酸化系呼吸鎖は再構成実験から通常の酢酸菌であるAcetobacter acetiとGluconobacter suboxydansと同様に、アルコ-ル脱水素酵素(ADH)、ユビキノンそしてユビキノ-ルオキシダ-ゼであるチトクロムb0から成っていることが示された。一方、メタノ-ル酸化系呼吸鎖はエタノ-ル酸化系とは全く別の呼吸鎖で、メタノ-ル脱水素酵素(MDH)、チトクロムCそしてチトクロムCオキシダ-ゼであるチトクロムc0から成ることが示された。
(2)A.methanolicusのMDHの構造と機能:メタノ-ル培養菌から2種類のMDHが精製された。一方のMDHは通常のメチロトロ-フにみいだされているα_2γ_2構造を有していたが、もう一つはα_2βγ_2構造をもつ新規な酵素で、常に全体の20〜30%がこの形態でペリプラズムに存在することが示された。また、クロマトグラフィ-によりβサブユニットだけの画分も得られることよりα_2γ_2酵素は調製時にβサブユニットを解離した可能性が示された。
(3)酢酸菌ADHの構造と機能:A.methanolicusのグリセロ-ル培養菌の細胞膜から精製されたADHはG.suboxydansやA.acetiのADHと同様に三つのサブユニットから成り、そのサブユニットIにはPQQとヘムCが、サブユニットIIには二分子のヘムCが存在することが示された。G.suboxydansのADHはサブユニットI IIIとサブユニットIIに解離することができ、前者のサブユニットだけでも酸性域での酵素活性を示したが、そのサブユニットI IIIにサブユニットIIを再構成することで本来の酵素活性が回復することが示された。

  • 研究成果

    (12件)

すべて その他

すべて 文献書誌 (12件)

  • [文献書誌] E.Shinagawa,K.Matsushita O.Adachi,M.Ameyama: "Evidence for electron transfer via ubiquinone between quinoproteins D-glucose dehydrogenase and alcohol dehydrogenase of Gluconobacter suboxydans" Journal of Biochemistry. 107. 863-867 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] K.Matsushita,Y.Nagatani E.Shinagawa,O.Adachi M.Ameyama: "Reconstitution of the ethanol oxidase respiratory chain in membranes of quinoprotein alcohol dehydrogenase-deficient Gluconobacter suboxydans subsp.a strains" Journal of Bacteriology. 173. 3440-3445 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] K.Matsushita,Y.Takaki E.Shinagawa,M.Ameyama O.Adachi: "Ethanol oxidase respiratory chain of acetic acid bacteria.Reactivity with ubiquinone of pyrroloquinoline quinone-dependent alcohol dehydrogenases purified from Acetobacter aceti and Gluconobacter suboxydans" Bioscience Biotechnology and Biochemistry. 56. 304-310 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] K.Matsushita,K.Takahashi M.Takahashi,M.Ameyama O.Adachi: "Methanol and ethanol oxidase respiratory chains of the methylotrophic acetic acid bacterium,Acetobacter methanolicus" Journal of Biochemistry,No.6,. 111. (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] K.Matsushita,K.Takahashi O.Adachi: "Isolation of two different types of methanol dehydrogenase from Acetobacter methanolicus" manuscript.

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] M.Ameyama,K.Matsushita,E.Shinagawa O.Adachi: "Biochemical and Physiological Functions of pyrroloquinoline quinone" Academic Press Inc.,229-270 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [文献書誌] E. Shinagawa, K. Matsushita, O. Adachi & M. Ameyama: "Evidence for electron transfer via ubiquinone between quinoproteins D-glucose dehydrogenase and alcohol dehydrogenase of Gluconobacter suboxydans." J. Biochem.107. 863-867 (1990)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] K. Matsushit, Y. Nagatani, E. Shinagawa, O. Adachi & M. Ameyama: "Reconstitution of the ethanol oxidase respiratory chain in membranes of quinoprotein alcohol dehydrogenase-deficient Gluconobacter suboxydans subsp. alpha strains." J. Bacteriol.173. 3440-3445 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] K. Matsushita, Y. Takaki, E. Shinagawa, M. Ameyama, & O. Adachi: "Ethanol oxidase respiratory chain of acetic acid bacteria. Reactivity with ubiquinone of pyrroloquinoline quinone-dependent alcohol dehydrogenases purified from Acetobacter aceti and Gluconobacter suboxydans." Biosci. Biotech. Biochem.56. 304-310 (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] K. Matsushita, K. Takahashi, M. Takahashi, M. Ameyama, & O. Adachi: "Methanol and ethanol oxidase respiratory chains of the methylotrophic acetic acid bacterium, Acetobacter methanolicus." J. Biochem.111, No. 6. (1992)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] K. Matsushita, K. Takahashi, & O Adachi: "Isolation of two different types of methanol dehydrogenase from acetobacter methanolicus."

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より
  • [文献書誌] M. Ameyama, K. Matsushita, E. Shinagawa & O. Adachi: "Biochemical and physiological functions of pyrroloquinoline quinone." "Vitamins and Hormones". Academic Press Inc., Florida, 46. 229-270 (1991)

    • 説明
      「研究成果報告書概要(欧文)」より

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公開日: 1993-03-16  

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