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本研究は、マレック病(以下MDV)における腫瘍の発生、維持に関連する遺伝子、あるいはMDVの複製、増殖に必要な遺伝子を明らかにすることを目的とし、モデル系としてMDV由来リンパ腫株化細胞を用いて本年度以下のような知見を得た。
1.MDV由来リンパ腫株化細胞中には複数のMDVゲノムが存在するがin vivoでニワトリに感染した場合のMDVの遺伝子の発現と比較してウイルス特異的タンパク質の合成はゲノムのごく一部に限られている。リンパ腫株化細胞中においてMDVゲノムからの発現は主として倒置反復配列の領域から起こっていることを示した(同様の結果が最近報告された)。
2.MDVのDNAのBamHlーH領域から発現する1.8キロ塩基のmRNAに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドを合成し、このオリゴヌクレオチドでリンパ腫株化細胞を処理することによって、対応するmRNAの遺伝子発現は抑制され、リンパ腫株化細胞の悪性形質転換の性質(無限増殖や軟寒天中での増殖)が抑制されることを示し、この遺伝子がMDVにおける腫瘍原性の維持に重要な役割を果していることを明らかにした。
3.ウイルスを産生しないリンパ腫株化細胞中のMDVゲノムDNAをウイルス産生性のリンパ腫株化細胞中に存在するMDVのDNAと制限酵素切断パタ-ンを用いて比較することによってMDVの複製に必要な遺伝子部位に変化が起こっていないか否かについて検討しウイルスを産生しないMDCCーRP1細胞株中のMDVゲノムはBamHlーH領域に構造変化が起こっていることを示した。この構造変化の起こっている領域の近傍にはMDVのDNAの複製開始点と推定されるDNA領域が存在し、この構造変化がRPー1細胞中でMDVが産生されなくなっている原因であることを示唆した。
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