新規に発見した自己補体反応制御膜糖蛋白HRF20の研究

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02670210
• 研究機関: 福岡大学
• 研究代表者: 岡田 則子 福岡大学, 医学部, 助手 (20160682)
• キーワード: HRF20 / リポソ-ム / 補体抑制 / 同種認識 / 種特異性

研究概要

補体第二経路は、抗体などの介在なしにも活性化反応を起こし得る。侵入異物である細菌などの固層膜上に存在するアミノ基や水酸基にC3のチオエステル基部分が反応することにより補体反応が始動する仕掛けとなっている。しかし、自己細胞には、同種の補体反応を特異的に抑制する膜分子が存在するため、補体反応は異物に対する反応のみが許されるので、自己非自己の識別が、抗体等を介在しなくても出来る。このような役割を担う分子の一つとして発見したHRF20(20kDa homologous restriction factor)は、同種補体の最終ステップの膜障害反応を抑制する。このHRF20について以下の研究結果を得た。
(1)HRF20をリポソ-ム膜に組み込み、同時にTNPーCapーDPPE(Trinitrophenolーcaproylーdipalmitoylphospatidylethanolamine)も組み込んだリポソ-ムを作成した。これにantiーTNP抗体を作用させ、補体反応が起こり易いようにしておき、これを各種動物の血清と反応させた。各種動物血清によるリポソ-ムの溶解反応を指標にして、HRF20の有無の効果を検討した結果、ヒト血清補体は強力に抑制されるが、ウサギ、モルモット、ラット、マウス等の血清補体に対しては、ほとんど抑制を示さなかった。サル血清に対しては、ヒトにくらべると少し弱かったが、明らかな抑制が認められヒトとの交叉抑制性があった。これに対し、ウズラ血清補体によるリポソ-ム溶解反応は、ヒト血清に劣らず強力に抑制された。ヒトと離れた種であるが、その同種認識システムがたまたま一致していたのだと考えた。
(2)CHO細胞にHRF20cDNAをtransfectしてHRF20を発現させたとき、ラットやモルモットの補体は抑制しないがヒトの補体は抑制した。このことから、種特異性を決めているのはペプチド構造であることが推察された。しかし、糖鎖の役割を必ずしも否定するものではないことを考えられる。

研究成果

• [文献書誌] A.Tomita,N.Okada & H.Okada: "Comparative study of decay accelerating factor and HLA-DR within the CD8-bright population." Eur.J.Immunol. 21. 1843-1848 (1991)
• [文献書誌] M.Yamashina,E.Ueda,T.Kinoshita,T.Tanami et.al: "Inherited complete deficiency of 20kDa homologous restriction factor(CD59)as a cause of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria." New Engl.J.Med.323. 1184-1189 (1990)
• [文献書誌] H.Okada,N.Okada & T.Hideshima: "HRF20,a membrane inhibitor of complement attack,does not protect cells from the cytbtoxic reaction by lymphokine activated killer cells." Biochem.Biophys.Res,Comm.171. 717-721 (1990)
• [文献書誌] R.Harada,N.Okada,T.Fijita & H.Okada: "Purification of 1F5 antigen which prevents complement attack on onhomologosu cell membranes." J.Immunology.144. 1823-1828 (1990)
• [文献書誌] T.Hideshima,N.Okada & H.Okada: "Expression of HRF20,a regulatory molecule of complement activation,on perpheral blood mononuclear cells." Immunology. 69. 396-401 (1990)
• [文献書誌] N.Okada,R.Harada & H.Okada: "Erythrocytes of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria patients acqure resistance to complement attack by purified 20kDa homologous restriction factor(HRF20)" Clin.Exp.Immunology.80. 109-113 (1990)
• [文献書誌] A.Tomita,N.Okada,R.Watanabe,T.Shinohara,H.Toriya et.al: "Flontiers of mucosal immundogy Vol 1:Altered expression of DAF & HRF20 regulatory molecules of complement activation on eripheral bood mononuclear cells in Ulcerative colitis." Elsevier Sience Publishers., (1991)
• [文献書誌] R.Watanabe,A.Tomita,N.Okada,H.Toriya et.al: "Flontiers of mucosal immundogy Vol 1:Immuno histological study of Ulcerative colitis using monoclonal autibadies against HRF20 and DAF." Elsevier Sience Publishers., (1991)