研究概要 |
Denk3の方法に促い,C3Hマウスにグリヤオフルビンを投与し,マロリ-体(MB)を作製し,摘出した肝をdetergent処理した。間接蛍光抗体法,免疫電顕法でMBと中間径フィラメント(1F)の関係について,1Fの表現型の変化と蛋白分解系の一つであるユビキチン(Ub)の関与の面から検討した。一次抗体には二種のマウスサイトケラチン(CK)(CK55,CK44)に対する抗体,ヒトCKに対する抗体(AE3,EAB903)とポリクロ-ナルUb抗体を用いた。 グリヤオフルビン投与群(GF群)ではMBはCK55で染色されたが,肝細胞の染色は,モザイク状に染色されるものと,全く染色されないものが存在した。AE3,EAB903はMBのみ染色された。また,CK44でMB,細胞質ともに染色される肝細胞が存在した。CK55とUbの二重染色ではMBは両者で染色され,CK55の反応する細胞質ではUbの反応があり,CK55の反応がなければUbの反応もなかった。免疫電顕では,GF群ではMBの存在する肝細胞でも1Fは観察できたが,CK55が全く存在しない1Fもあった。そして,MBにはCK55,Ubともに存在した。UbはCK55陽性の1Fには強い反応を示したが,CK55陰性の1Fには存在しなかった。 <まとめ>MB形成過程において現われるCK染色陰性のいわゆるempty cellは1Fが存在しないためではなく、1Fの表現型の変化に起因することが判明した。この変化はMB形成の原因となりえ,正常の表現型を示す1Fの分解にはUbの関与が示唆された。Ubの介する蛋白合解系の異常もMB形成の原因の一つと思われた。
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