移植腎の拒絶反応に動員されるT細胞抗原受容体の解析

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02670718
• 研究機関: 北里大学
• 研究代表者: 小幡 文弥 北里大学, 医学部, 講師 (60129236)
• キーワード: T細胞抗原受容体 / HLAーDR / MLR / 同種免疫応答

研究概要

移植腎に対する拒絶反応には、ドナ-のHLAーDR抗原が重要であることが知られている。本年度では、昨年度にひき続き、試験管内同種免疫反応である混合リンパ球培養反応(MLR)において、DR抗原認識に動員される下細胞抗原受容体(TCR)の解析を進めるとともに、腎からのT細胞分離法の確立を行った。MLRの応答細胞、刺激細胞としてDRB1*0403/*1201およびDRB1*/0406ホモ接合体を選び、DR分子上の1個のアミノ酸残基( ^<37>Y)のみを認識するT細胞集団を誘導した。昨年度までに確立したAnchorーLigation PCR法にてTCRB鎖cDNAの塩基配列を決定した。解析した27個のcDNAMLRで得られた結果が、in vivo同種免疫反応である移植腎拒絶反応においてもあてはまるか否かを検討するため、以下の予備実験を行った。剖検腎からバイオプシ-用針で少量の腎組織を採取し、ハサミ細断の後室温で1時間コラゲナ-ゼ処理を行った。リンパ球の損傷、腎細胞との分離を調べるため、人為的に末梢血リンパ球を混入させた試料についても検討を行った。その結果、0.5mg/mlのコラゲナ-ゼ処理がリンパ球に損傷を与えず腎組織を効果的に分解すること、又、腎細胞とリンパ球は、比重遠心法によりほぼ完全に分離できることがわかった。

研究成果

• [文献書誌] Obata F,Ito K,Kaneko T,Ynag Y,Onda K,Ito I,Yabe N,Watanabe K & Kashiwagi N: "HLAーDR gene frequencies in the Japanese population obtained by oligonucleotide genotyping." Tissue Antigens. 38. 124-132 (1991)
• [文献書誌] Watanabe K,Yuge K,Sato K,Sonoda K,Masaki K,Maruyama S,Ohkubo M,Obata F,Otani F,Kaneko T,et al.: "Donor bone marrow cell facilitates induction of tolerance to kidney allografts in dogs treated with fractionated lymphoid irradiation and FK506." Transplantation Proceedings. 23. 568-572 (1991)
• [文献書誌] Onda K,Obata F,Tsunoda M,Kato H,Ito I,Yang Yーg,& Kashiwagi N.: "Sequence analysis of Tーcell receptors used in allogeneic mixed lymphocyte reaction." Kitasato Archives of Experimental Medicine.
• [文献書誌] Obata F and Kashiwagi N: "Oxford University Press"
• [文献書誌] Obata F: "Oxford University Press" Tーcell recognition of HLAーclass II molecules.In HLA 1991 vol I(eds.Tsuji K,Sasazuki T,Aizawa M).
• [文献書誌] Obata F: "Oxford University Press" Tーcell recognition of HLAーclass II molecules.In HLA 1991 vol I(eds.Tsuji K,Sasazuki T,Aizawa M). "Joint report of the Tーcell component:Sequence analysis of the Tーcell receptor utilized for recognition of allogeneic HLAーclass II molecules.In HLA 1991 Vol I(eds.Tsuji K,Sasazuki T,Aizawa M)"