| 研究課題/領域番号 |
02670796
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| 研究機関 | 順天堂大学 |
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研究代表者 |
堀田 喜裕 順天堂大学, 医学部・眼科, 助手 (90173608)
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| 研究分担者 |
秋山 修一 順天堂大学, 医学部・眼科, 助手 (10192915)
横山 利幸 順天堂大学, 医学部・眼科, 助手 (00191528)
藤木 慶子 順天堂大学, 医学部・眼科, 講師
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| キーワード | ベクタ- / 遺伝子移入 / 遺伝子発現 / 遺伝子治療 / 硝子体 |
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| 研究概要 |
ベクタ-については最近広く使われているレトロウイルスも考えたが、ウイルスを培養したり、titerしたりすることが当研究室では現在困難であるため、まずpcD使うことにした。pcDのSV40のearly lesionのうち必要な部分のみを残し、家兎には発現していないヒトOATのcDNAを組み込んだ。プロモ-タ-側にcDNAの5'側があるクロ-ンを、制限酵素を使って検討して選び出した(pcDHOAT)。このプラスミドをcompetent cellに移入し、大量に増やし、精製した。家兎の腹腔内にペントバルビタ-ルを注射して麻酔し、輪部から4mmの部分より針を刺入し、硝子体中に約1μgのpcDHOATを注入した。白内障になったものもあるが現在眼球摘出をする準備をしている。
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