グリカンPIーアンカ-によるアルカリ性ホスファタ-ゼ分子の修飾と病態分析への応用

1990 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02671072
• 研究機関: 埼玉医科大学
• 研究代表者: 菰田 二一 埼玉医科大学, 医学部, 助教授 (10049835)
• 研究分担者: 坂岸 良克 埼玉医科大学, 医学部, 教授 (90049768) ; 小山 岩雄 埼玉医科大学短期大学, 臨床検査学科, 助教授 (30153688)
• キーワード: アルカリ性ホスファタ-ゼ / GPIーアンカ- / Kasaharaアイソザイム / 癌化 / PIPLC

研究概要

生体膜に局在する酵素は、生体膜に滞まるため一般に疎水性アミノ酸配列を持つとされていたが、近年、アルカリ性ホスファタ-ゼ(ALP)を始めとする膜酵素には前記配列が無く、かわりに糖脂質様膜アンカ-(GPIーアンカ-)がこれに置き換えられている。但しALPの一部、特に小腸型ALPにはGPIーアンカ-を含まないというSeetharamらの報告(Arch.Biochem.Biophys.253,189,1987)もある。
本研究では先づ、ラットに実験的糖尿病を起こさせると血清中ALP活性が著明に上昇したが、この際血中に出現してきたALPが可溶性の小腸ALPであることを証明できた。つまり小腸ALPもGPIーアンカ-を持ち、その後特定のリパ-ゼで遊離して血流中へ分泌されるものと考えられた。次に、正常兎の腎及び肝ALPは、他の動物では臓器非特異型を産生しているのに対し、小腸型ALPを産生していた。そこで兎腎及び肝の小腸様ALPの性状を調べてみると、ヒトの肝硬変や肺癌で産生される小腸様ALP(Kasaharaアイソザイム)と近似し、このALPもGPIーアンカ-を持つことがわかった。更に、ヒト肝硬変並びに肝癌で産生される小腸様ALPは、特に癌化に伴ってGPIーアンカ-部分がphosphatidylinositolーspecific phospholipase C (PIPLC)処理に対して感受性が低くなっていた。これは、癌化に伴ってGPIーアンカ-の構造が変化している可能性が高い。

研究成果

• [文献書誌] Unakami,S.,Komoda,T.,Sakagishi,Y.: "Translocation of intestinal alkaline phosphatase in streptozotocininduced diabetic rats." Int.J.Biochem.22. 1325-1331 (1990)
• [文献書誌] Arai,Y.,Koyama,I.,Hirita,N.,Sakai,T.,Sakagishi,Y.,Komoda,T.: "Developmental changes in the antigenicity and sugar chain heterogeeity of rabbit alkaline phosphatases." Int.J.Biochem.22. 143-152 (1990)
• [文献書誌] 坂井 隆夫,牧田 明,近藤 朝明,滝川 一,三宅 和義,山中 正己,菰田 二一,坂岸 良克: "phosphatidylinositolーspecitic phospholipase C処理した血清アルカリ性ホスファタ-ゼアイソザイムのpolyacrylamideーgel disc 電気泳動法による検討" 医学のあゆみ. 155. 741-742 (1990)
• [文献書誌] Nagata,A.,Miura,M.,Komoda,T.: "Sandwich assay for carcinoembryonic antigen with immobilized lectins and a monoclonal antibody." Tumor Biol.12. 35-44 (1991)
• [文献書誌] FujimoriーArai,Y.,Koyama,I.,Hirano,K.,Sakagishi,Y.,Komoda,T.: "Purification and partial characterization of intestinalーlike alkaline phosphatase in rabbit kidney." Arch.Biochem.Biophys.284. 320-325 (1991)
• [文献書誌] Iino,T.,Matsushita,M.,Komoda,T.,Sakagishi,Y.: "Apparent alkaline phosphatase in serum measured with phosphorylcholine as substrate." Clin.Chem.(1991)