グリカンPIーアンカ-によるアルカリ性ホスファタ-ゼ分子修飾と病態分析への応用

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02671072
• 研究機関: 埼玉医科大学
• 研究代表者: 菰田 二一 埼玉医科大学, 医学部, 助教授 (10049835)
• 研究分担者: 小山 岩雄 埼玉医科大学, 短期大学. 臨床検査学科, 助教授 (30153688) ; 坂岸 良克 埼玉医科大学, 医学部, 教授 (90049768)
• キーワード: アルカリ性ホスファタ-ゼ / PIPLC / ステアリン酸 / GPIーアンカ- / ペプチド-アンカ-

研究概要

前年度の成績から、実験的糖尿病を起こさせたラット血清中のアルカリ性ホスファタ-ゼ(ALP)は、小腸型であったことから、その由来を調べた。
In vitroの実験系で、ラット十二指腸のALPはホスファチジルイノシト-ル特異的ホスホリパ-ゼC(PIPLC)により遊離したが、回腸のALPはこの処理によって遊離せず、酵素学的にラット血清中の主たるALPは回腸型に類似していた。つまりラット回腸のALPは、従来の如くペプチドanchorもしくはヒト赤血球コリンエステラ-ゼの如く、GPI部位がアシル化されている可能性が考えられた。
一方、正常組織より精製した小腸ALPの化学分析の結果、本酵素はパルミチン酸、ステアリン酸、イノシト-ルをサブユニット当り各1分子持つことがわかった。更に、メチルニトロソウレアで実験的発癌を起こさせた胃癌組織中の小腸ALPは、他の成分は同一であるのに比し、ステアリン酸含量が2倍に増加していた。従って、小腸ALP分子中のGPI部位の脂肪酸の修飾によりPIPLCに対する感受性が異なることが示唆された。興味深いことに、ラット小腸のALPの内、PIPLC処理で遊離してこないALPは、パパイン処理で遊離することがわかった。この成績は、ラット小腸ALPは丁度IgG receptorの如く、ペプチドとGPIーanchorの2種のALPがあるのかも知れない。

研究成果

• [文献書誌] T.Irino,M.Matsushita,T.Komoda,Y.Sakagishi: "Apparent alkaline phosphatase activity in serum measured with phosphorylcholine as substrate" Clinical Chemistry. 37. 479 (1991)
• [文献書誌] T.Sakai,N.Hirota,T.Yokoyama,T.Komoda: "Ultracytochemical and biochemical investigations of alkaline phosphatase and 5^1ーnucleotidase activities in carcinogenーinduced well and poorlyーdifferentiated adenocarcinoma of the rat stomach." Acta Histochemica et Cytochemica. 24. 301-314 (1991)
• [文献書誌] A.Nagata,N.Hirota,T.Sakai,M.Fujimoto,T.Komoda: "Molecular nature and possible presence of a membranous glycanーphosphatidylinositol anchor of CA 125 antigen." Tumor Biology. 12. 279-286 (1991)
• [文献書誌] I.Koyama,Y.FujimoriーArai,N.Hirota,T.Sakai,Y.Sakagishi,T.Komoda: "Liverーlike alkaline phosphatase in the tissueーunspecific type enzyme found in rabbit organs." Biochimica et Biophysica Acta. 1080. 165-172 (1991)
• [文献書誌] T.Komoda,I.Koyama,Y.FujimoriーArai,F.Yamagishi,Y.Sakagishi,N.Hirota: "Lectin affinity chromatography as a useful tool for determining the heterogeneity of alkaline phosphatase:intestinal like enzyme." Proceedings of AsianーPacific Congress of Clinical Biochemistry,Elsevier Scientific Co.(1992)
• [文献書誌] 菰田 二一,三浦 雅一,小山 岩雄(分担): "電気泳動法のすべて(Medical Technology別冊)" 医歯薬出版株式会社(桜林郁之介,熊坂一成編), 9 (1991)