HDLーアポAI及びそのイソ蛋白の生体内代謝回転様式と臓器内mRNAレベルの研究

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02671114
• 研究機関: 福岡大学
• 研究代表者: 朔 啓二郎 福岡大学, 医学部, 講師 (40183371)
• 研究分担者: 山本 匡介 佐賀医科大学, 医学部, 講師 (00117285)
• キーワード: 高比重リポ蛋白 / アポリポ蛋白AI / 代謝回転実験 / メッセンジャ-RNA / 家兎

研究概要

HDLの主要な構成蛋白アポAIは血中HDLレベルのみならず組織のコレステロ-ル貯臓を規制する役割を担う。アポAIの合成増大によるHDLの増加はコレステロ-ル逆転送系の増大と一致するという大前提のもとで、種々の条件下におけるアポAIのカイネテイクスをウサギ生体を用い検討した。【まとめ】0.5%コレステロ-ル負荷食によりHDLーアポAIの異化速度(FCR)は増大し、合成率も増加した。同時に、小腸でのアポAlmRNAレベルの増加を認めた。LDLー受容体欠損症のWHHLウサギ(ホモ接合体)はHDLが欠損しているが、その機序として、HDLーアポAIのFCRの増大とアポAI合成率の低下が生体内代謝実験より明確になった。また、小腸のアポAImRNAレベルの低下も認めた。WHHLウサギの動脈硬化進展にLDLのみならずHDLーアポAIの合成低下もからんでいることを示し、LDL受容体欠損状態がアポAIのKineticsに影響を及ぼす可能性が示唆された。脂質低下剤プロブコ-ルはコレステロ-ル負荷条件下にてHDLーアポAIのFCRを増加し、その合成率を低下したことを明確にした。また、プロアポAIの合成率が低下していたことをも証明した。我々は、ヒトプロアボAIを大腸菌を宿主として発現させ、精製した。ヒトプロアポAIはウサギ体内で、ヒト成熟型アポロAIに1:1の転換をおこすことを発見し、合成ヒトプロアポAIをウサギに注入することによりHDL代謝をさらにくわしく観察できた。また、脂質転送蛋白(CETP)はリポ蛋白間のコレステロ-ルエステルの転送を行うが、これらのHDLアポAI代謝に及ばす影響も同時に検討した。ウサギはこの脂質転送能が高いと報告されている。antiーウサギーCETP抗体をウサギ静脈内に注入した前後でのHDLーアポAI代謝回転実験を行ったが、アポAI代謝回転にはなんら影響は認めなかった。(抗ウサギCETP抗体はコロンビア大学Dr.Alan Tallにより入手したものを用いた。)

研究成果

• [文献書誌] Saku,K.,Yamamoto,K.,et al: "Kinetics of HDL-apoA-I in the WHHL rabbit,an animal model of familial hypercholesterolemia." Atherosclerosis. 79. 225-230 (1989)
• [文献書誌] Saku,K.,Fujino,M.,Yamamoto,K.,et al: "Cardiac function of WHHL rabbit,an animal model of familial hypercholesterolemia." Artery. 17. 271-280 (1990)
• [文献書誌] Saku,K.,Harada,R.,Yamamoto K.,et al: "Apolipoprotein AI mRNA levels in WHHL rabbits." Atherosclerosis. 84. 73-74 (1990)
• [文献書誌] Ying,H.,Saku,K.,et al: "Putative mechanisms of action of probucol on high denssity lipoprotein apolipoprotein A-I and its isoproteins kinetics in rabbits." Biochimica et Biophysica Acta. 1047. 247-254 (1990)
• [文献書誌] Saku,K.,et al: "In vivo conversion of recombinant human proapolipoprotein AI(rh-Met-Proapo AI)to apolipoprotein AI in rabbits." Biochimica et Biophysica Acta.
• [文献書誌] 朔 啓二郎他: "COMMON DISEASE SERIES 19,高脂血症(共著)" 南江堂, 264 (1991)