腎炎惹起物質ネフリトゲノサイドの分子生物学的解析

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 02807034
• 研究機関: 産業医科大学
• 研究代表者: 平野 英保 産業医科大学, 医学部・生化学, 講師 (50040241)
• 研究分担者: 後藤 貞夫 産業医科大学, 医学部・生化学, 助教授 (50131917) ; 東 監 産業医科大学, 医学部・生化学, 教授 (30028386)
• キーワード: ネフリトゲノサイト / 線維化 / コラ-ゲン / 創傷治癒 / 増殖性腎炎 / 膜性腎炎 / ファイブロネクチン / 形態制御操作

研究概要

ネフリトゲノサイドは極めて微量で、基底膜の増殖を起こす。その結果として、糸球体の透析機能の低下即ち、増殖性腎炎を起こす(故柴田整一博士等)。このネフリトゲノサイドの周囲をとり巻いている基底膜の構成成分に、TypeIVコラ-ゲンやイムノゲノサイドがある。このイムノゲノサイドに対する抗体が、膜性腎炎を引き起こす。ネフリトゲノサイドは、ファイブロネクチンやラミニンのように、形態変異の誘導を引き起こすだけではなく、なおかつ細胞の機能そして腎機能の調節の変異を起こす。その結果として、慢性腎炎を、引き起こしてくる。
そこでλgt11にクロ-ン化したcDNALibraryから、腎臓の基底膜に対する抗体で拾い上げてきた34個の陽性プラ-クのサザンブロット分析を行った。この中の21番目のクロ-ンは肝硬変の線維化の時に急激に上昇した。コラ-ゲンのTypeI、III、IVも同じく遺伝子発現が上昇していた。この21番目のクロ-ンが基底膜の増殖性に関与する事を考え更に、塩基配列の決定を行い、GenBankとのホモロジ-検索でGーアクチンと結合するプロフィリンである事が判明した。線維化の時期に活性化しているDNA結合蛋白を見てみると、CRE及びTRE結合蛋白が活性化していた。
ファイブロネクチンのTypeIIIリピ-トにあるV10ペフチドの機能を胸腺細胞で見てみると、分化を誘導する事が分かった。
PCRを使った高速cDNA作成法を用いて、DirectにネフリトゲノサイドのcDNAを得る方法を検討を行ったが成功するには至っていない。現在も引き続き追究を行っている。この過程であみだした高速MaxamGilbert法で、ウレタン発癌の機構を調べると、Kiーras遺伝子の点突然変異で、原発巣で点突然変異の部位が異なっている事が分かった。

研究成果

• [文献書誌] Hatsumi Taniguchi,Shigeo Kubomura,Hideyasu Hirano,Kumiko Mizue,,Midori Ogawa and Yasuo Mizugushi: "Cloning and characterization of a gene encoding a new thermostable hemolysin from Vibrio parahaemolyticus" FEMS Microbiology Letters. 67. 339-346 (1990)
• [文献書誌] Hisamitsu Ohmori,Tadamasa Murakami,Aki Furutani,Ken Higashi,Hideyasu Hirano,Sadao Gotoh et al: "Simultaneous Activation of Heat Shock Protein(hsp70)and Nucleolin Genes during in Vivo and in Vitro Prereplicative stages of Rat Hepatocytes" Exptl.Cell Res.189. 227-232 (1990)
• [文献書誌] Takahiko Katoh,Yuji Karasaki,Hideyasu Hirano,Sadao Gotoh and Ken Higashi: "Translocation of protein Kinase C to membranes Induced by TNF does not cause the inhibition of EGF binding to human with cells" Biochem,Biophys.Res.Comm.168. 690-695 (1990)
• [文献書誌] Takashi Mita,Shunsuke Sashihara,Ikuho Aramaki,Yukiko Fueta and Hideyasu Hirano: "Unusual Biochemical Development of Genetically Seizure-Susceptible El mice" Brain Res:Developmental Brain Res.64. 27-35 (1991)
• [文献書誌] Keiroh Utsumi,MotoyuKi Sawada,Seiji Narumiya,Jun Nagamine et al,Hideyasu Hirano,Hiromi Fujiwara: "Adhesion of immature thymocytes to thymic stromal cells through fibronectin molecules and its significance for the induction of thymocyte differentiation" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 88. 5685-5689 (1991)
• [文献書誌] Hisamitsu Ohmori,Tetsuya Abe Hideyasu Hirano,Tadamasa Murakami et al.Taisei Nomura & Ken Higashi: "Comparison of Ki-ras Gene Mutation Among Simultaneously Occurring Multiple Urethan-induced Lung Tumors in Individual Mice" Carcinogenesis.