| 研究概要 |
昨年度,ホルマリン固定標本からDNAを抽出後,PCR法を用いることよってONA中のHTLVー1遺伝子断片を証明する方法を確立した。
今年度は,この方法を用いることによって,皮膚腫瘍組織中のHTLVー1とヒト乳頭腫ウイルス(HPV)について,それらの発現を検討した。
〈方法〉1.HTLVーI遺伝子の検索には,HTLVー1抗体検査ができなかった年代の皮膚リンパ腫組織,つまりATLの診断が不可能であった時代のホルマリン回定標本(菌状息肉症:3例,nonーHodgkinリンパ腫:6例,Hodgkin病:1例)を対象とした。2.HPVの検索には,ヒト皮膚腫瘍組織中でもHPVの発癌への関与が疑われている verrucous carcinoma(2例),bowenoid papulosis(1例)を対象とした。3.当科に保存してあるホルマリン固定パラフィン包理標本から10μm 切片10枚を作成したのち,脱パラフィン後,プロテ-ゼK処理,フェノ-ル・クロロホルム法にてDAを抽出した。4.それぞれのウイルスに特異的とされる塩基配列領域のプライマ-を用いて,PCR法により抽出DNAから増幅操作を行った。
〈結果〉1.10例の皮膚リンフォ-マ-組織からは,1例のnonーHodgkinリンフォ-マ,1例のHodgkin病組織からHTLVー1特異的配列が増幅された。
2.HPV遺伝子の検索では,verrucous carcinoma,bowenoid papulosis全例でHPV16型特異的配列が増幅された。
以上の結果から,皮膚発癌に関与する遺伝子検索にPCR法が有甲であること,本邦における皮膚リンフォ-マにHIVー1が,また高分化型有棘細胞癌にHPV16型が多く検出されることも判明した。
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