1991 年度実績報告書

GTP結合蛋白質の内在性モノ(ADPーリボシル)化の生理的役割

研究課題

研究課題/領域番号	02807205
研究機関	東京工業大学
研究代表者	田沼靖一東京工業大学, 生命理工学部, 助教授 (10142449)
キーワード	モノ(ADPーリボシル)化反応 / モノ(ADPーリボシル)トランスフェラ-ゼ / G蛋白質 / アデニレ-トシクラ-ゼ / 血小板 / 細胞情報伝達系
研究概要	ヒト血小板の細胞質画分より3種のモノ(ADPーリボシル)トランスフェラ-ゼAを精製した。そのうちの一つ、トランスフェラ-ゼAIと血小板膜を〔 ^<32>P〕NAD^+の存在下にインキュベ-トした後、SDS電気泳動とオ-トラジオグラフィ-により標的蛋白質を分析したところ、分子量45Kの蛋白質に特異的に放射能が取り込まれた。この放射性物質をホスホジエステラ-ゼで分解すると、5'ーAMPの位置に放射能が回収された。また、中性ヒドロキシルアミンで処理すると蛋白質との結合部位が切断されることより、放射性物質はアルギニン残基に結合していることが示された。この反応はあらかじめコレラ毒素と非放射性NAD^+の存在下にプレインキュベ-ションした膜においては見られなかった。これらの結果より、AIはGsのαサブユニットのアルギニン残基をモノ(ADPーリボシル)化することが示された。アデニレ-トシクラ-ゼ系の調節におけるトランスフェラ-ゼAIの役割について血小板膜を用いて調べた。ヒト血小板膜をトランスフェラ-ゼAIとNAD^+でインキュベ-トすると、Gsαのモノ(ADPーリボシル)化に伴いアデニレ-トシクラ-ゼ活性が2〜3倍に上昇した。この活性化はプロスタグランジン(PG)E1の添加によりさらに促進された。このメカニズムは以下のように考えられる。PGE1の作用により解離したGsαがAIによりモノ(ADPーリボシル)化される。これによってGsαのGTPア-ゼ活性が抑制され、βαの再結合が抑制される。その結果、活性型のGsαーGTPの寿命が長く保たれる。したがって、トランスフェラ-ゼAIはGsαのモノ(ADPーリボシル)化を介してアデニレ-トシクラ-ゼ活性を促進的に調節しているものと考えられる。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Seiーichi TANUMA: "Induction of tumor degeneration by sodium benzylideneascorbate." Anticancer Res.11. 1533-1538 (1991)
[文献書誌] Seiーichi TANUMA: "Effect of chemically defined tannins on poly(ADPーribose)glycohydrolase activity." Biochem.Int.14. 889-897 (1991)
[文献書誌] Seiーichi TANUMA: "Induction of Immunopotentiation activity by a proteinーbound polysaccharide,PSK." Anticancer Res.11. 993-1000 (1991)
[文献書誌] Seiーichi TANUMA: "Characterization of two forms of poly(ADPーribose)glycohydrolase in guinea pig liver." Biochemistry. 30. 5907-5912 (1991)
[文献書誌] Seiーichi TANUMA: "Mono(ADPーribosyl)ation of Gs by eukaryotic arginineーspecific ADPーribosylーtransferase stimulates adenylate cyclase system." Biochem.Biophys.Res.Commun.176. 1014-1019 (1991)
[文献書誌] Seiーichi TANUMA: "Antitumor,Antiviral and Immunopotentiating activities of pine cone extracts:Potential medicinal efficacy of natural and synthetic ligninーrelatedーrelated materials." Anticancer Res.11. 881-888 (1991)
[文献書誌] 田沼靖一: "細胞情報伝達と蛋白質モノ(ADPーリボシル)化反応ーGTP結合蛋白質の内在性モノ(ADPーリボシル)化による細胞情報伝達系の調節" 蛋白質・核酸・酵素, 14 (1991)
[文献書誌] 田沼靖一: "真核細胞の情報伝達応答系の調節と蛋白質の(ADPーリボシル)_n化反応." 生化学, 26 (1991)

1991 年度 実績報告書

GTP結合蛋白質の内在性モノ(ADPーリボシル)化の生理的役割

研究代表者

田沼 靖一 東京工業大学, 生命理工学部, 助教授 (10142449)

研究成果

[文献書誌] Seiーichi TANUMA: "Induction of tumor degeneration by sodium benzylideneascorbate." Anticancer Res.11. 1533-1538 (1991)

[文献書誌] Seiーichi TANUMA: "Effect of chemically defined tannins on poly(ADPーribose)glycohydrolase activity." Biochem.Int.14. 889-897 (1991)

[文献書誌] Seiーichi TANUMA: "Induction of Immunopotentiation activity by a proteinーbound polysaccharide,PSK." Anticancer Res.11. 993-1000 (1991)

[文献書誌] Seiーichi TANUMA: "Characterization of two forms of poly(ADPーribose)glycohydrolase in guinea pig liver." Biochemistry. 30. 5907-5912 (1991)

[文献書誌] Seiーichi TANUMA: "Mono(ADPーribosyl)ation of Gs by eukaryotic arginineーspecific ADPーribosylーtransferase stimulates adenylate cyclase system." Biochem.Biophys.Res.Commun.176. 1014-1019 (1991)

[文献書誌] Seiーichi TANUMA: "Antitumor,Antiviral and Immunopotentiating activities of pine cone extracts:Potential medicinal efficacy of natural and synthetic ligninーrelatedーrelated materials." Anticancer Res.11. 881-888 (1991)

[文献書誌] 田沼 靖一: "細胞情報伝達と蛋白質モノ(ADPーリボシル)化反応ーGTP結合蛋白質の内在性モノ(ADPーリボシル)化による細胞情報伝達系の調節" 蛋白質・核酸・酵素, 14 (1991)

[文献書誌] 田沼 靖一: "真核細胞の情報伝達応答系の調節と蛋白質の(ADPーリボシル)_n化反応." 生化学, 26 (1991)

1991 年度実績報告書

田沼靖一東京工業大学, 生命理工学部, 助教授 (10142449)

[文献書誌] 田沼靖一: "細胞情報伝達と蛋白質モノ(ADPーリボシル)化反応ーGTP結合蛋白質の内在性モノ(ADPーリボシル)化による細胞情報伝達系の調節" 蛋白質・核酸・酵素, 14 (1991)

[文献書誌] 田沼靖一: "真核細胞の情報伝達応答系の調節と蛋白質の(ADPーリボシル)_n化反応." 生化学, 26 (1991)