|
大腸菌の複製終結反応は、終結点と呼ばれる特異的な部位で、複製フォ-クが停止することによって起こる。これが起こるためには、2つの要素が必要である。ひとつは、染色体DNA上にある特異的な22bpの配列し終結点配列と呼ぶ)であり、他はその配列を認識し、結合する終結点結合タンパク質である。この二つが複合体を形成することで、はじめて終結点において、複製フォ-クの進行を、極性をもって阻害する活性が表われる。現在では、この複合体の標的が、複製フォ-クを構成するタンパク質のうちのDNAヘリカ-ゼにあり、そのヘリカ-ゼ活性の特異的で、極性をもった阻害が終結反応の分子機構であることも判明している。
この大腸菌の終結システムが、高等生物の複製においても有効か否かを調べた。そのため、SV40DNAの試験管内複製系を用いた。基質のSV40DNAに終結点配列を挿入し、反応液に終結点結合タンパク質を添加したところ、酵素試料として粗抽出液あるいは精製標品いずれを用いても、明らかな終結点での複製フォ-ク阻害が観察された。さらに、終結点とその結合タンパク質の複合体は、SV40のlargeT抗原の有するヘリカ-ゼ活性を特異的に阻害することも解った。以上の結果は、大腸菌の終結システムが、真核生物の系でも同様に有効であること、複製フォ-クの進行が、原核、真核問はず、基本的には同様の機構であることを強く示唆している。
|
