がん細胞の特性を決定する細胞骨格異常の生化学的解析

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03151076
• 研究機関: (財)東京都臨床医学総合研究所
• 研究代表者: 矢原 一郎 東京都臨床医学総合研究所, 細胞生物学研究部門, 研究員 (60109957)
• 研究分担者: 浜口 道成 名古屋大学, 医学部, 助教授 (90135351) ; 稲垣 昌樹 愛知がんセンター研究所, 放射線部, 研究員 (30183007) ; 永田 和宏 京都大学, 胸部疾患研究所, 教授 (50127114) ; 祖父江 憲治 大阪大学, 医学部, 教授 (20112047) ; 酒井 彦一 東京大学, 理学部, 教授 (80011477)
• キーワード: アクチン / 細胞骨格 / 細胞接着 / チロシンリン酸化 / がん細胞の分化 / 微小管 / ポリホスホイノシタイド / 中間フィラメント

研究概要

(1)細胞接着構造における各種細胞骨格タンパク質(アクチン、ミオシン、トロポミオシン、カルデスモン等)の分布局在が細胞がん化によってどのように変化するかを明らかにした(祖父江)。(2)細胞接着部位の内側に存在するタンパク質ラディキシンの構造と機能を解析し、それがチロシンキナ-ゼのよい基質であるエズリンとよく似ていることを見出した(月田)。(3)カドヘリンおよびカテニンのチロシンリン酸化と細胞がん化の間に密接な関係があることを見出した(浜口)。(4)pp60ー^<vーsrc>の機能発現にアクチン結合能をもつストレスタンパク質HSP90が必要であることをインビトロ系で明らかにした(矢原)。(5)リポコルキンIとPKC基質であるMARCKSがカルシウムイオノフォアやTPAによって細胞質から膜へ移行することを見出した(大和田)。(6)グリアフィラメントの構成タンパク質の4つのリン酸化部位のアミノ酸を同定し、インビトロのリン酸化実験より、それらのリン酸化を行うタンパク質キナ-ゼを同定した。このとき、それぞれのリン酸化部位を特異的に認識するモノクロ-ナル抗体を用いた(稲垣、松岡)。(7)M1白血病細胞の分化にともなって発現するビメンチン遺伝子のプロモ-タ-領域を詳細に解析し、分化時に発現を支配するシス領域を同定した(永田)。(8)トランスフォ-ムすると発現しなくなるcDNAクロ-ンを5つ得たところ、カルパクチンIとミオシン調節軽鎖のものがあった(崎山)。(9)細胞周期が間期からM期に入るとき微小管構築が著しく変化するが、それに関与するMAPキナ-ゼの基質となるMAP(p220)を同定した(酒井)。(10)PIP_2がαーアクチニンに結合すると、アクチンゲル化能を著しく促進することを見出した。またこの結果は抗PIP_2抗体によるPIP_2結合αーアクチニンの分布局在をよく説明する(深見)。

研究成果

• [文献書誌] Sobue,K.et al.: "Caldesmon,a novel regulatory protein in smooth muscle actomyosin system." Journal of Biological Chemistry. 266. 12115-12118 (1991)
• [文献書誌] Sato,N.,Tsukita,Sa.et al.: "Radixin,a barbed-end capping actin modulating protein,is concentrated at the cleavage furrow during cytokinesis." Journal of Cell Biology. 113. 321-330 (1991)
• [文献書誌] Minami,Y.,Yahara,I.et al.: "Analysis of native forms and their isoform compositions of the mouse 90-kDa heat shock protein,HSP90." Jouranl of Biological Chemistry. 266. 10099-10103 (191)
• [文献書誌] Nishizawa,K.,Inagaki,M.et al.: "Specific localization of phospho-intermediate filament protein in the constricted area of dividing cells." Journal of Biological Chemistry. 266. 3074-3079 (1991)
• [文献書誌] Nakamura,N.,Nagata,K.et al.: "Purification and characterization of a vimentin specific protease in mouse myeloid leukemia cells." Eur.Journal of Biochemistry. (1991)
• [文献書誌] Gotoh,Y.,Sakai,H.et al: "Xenopus M phase MAP kinase;Isolation of its cDNA and activation by MPF" EMBO Journal. 10. 2661-2668 (1991)